论文部分内容阅读
目的:原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)是我国常见的消化系统恶性肿瘤。7-乙基喜树碱(7-ethylcamptothecin)是一种新型喜树碱类衍生物其B环7位被乙基取代,喜树碱及其衍生物能靶向抑制拓扑异构酶Ⅰ而在临床产生良好抗肿瘤作用。本研究旨在研究7-乙基喜树碱在肝癌细胞中的抗肿瘤作用及进一步探讨其作用机制。研究方法:CCK-8细胞增殖实验检测7-乙基喜树碱对肝癌细胞增殖的抑制作用;采用细胞克隆形成实验的方法分析7-乙基喜树碱对肝癌细胞克隆形成能力影响;细胞周期试剂盒检测7-乙基喜树碱对肝癌细胞的细胞周期分布的影响;分别应用细胞凋亡试剂盒和Hoechst33342染色实验检测7-乙基喜树碱对肝癌细胞的细胞凋亡的影响。应用蛋白质印迹法分析7-乙基喜树碱对肝癌细胞caspase-3及其底物PARP蛋白表达水平的影响。在肝癌细胞内运用蛋白质印迹法检测7-乙基喜树碱对凋亡蛋白caspase-9及Bcl-2家族蛋白表达水平的影响。结果:7-乙基喜树碱显著抑制肝癌细胞增殖及克隆形成(P<0.01);7-乙基喜树碱干扰肝癌细胞周期分布且诱导肝癌细胞G1期阻滞(P<0.01);在肝癌细胞中7-乙基喜树碱以caspase依赖性的方式诱导细胞凋亡(P<0.01);7-乙基喜树碱增加凋亡蛋白caspase-3及其底物PARP的活性;在肝癌细胞中7-乙基喜树碱通过线粒体凋亡通路诱导肝癌细胞凋亡。结论:7-乙基喜树碱抑制肝癌细胞增殖及诱导肝癌细胞凋亡而产生抗肿瘤作用;7-乙基喜树碱通过线粒体凋亡通路诱导肝癌细胞凋亡。