【摘 要】
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L-鸟氨酸存在于生物体多种组织和细胞中,在生物体代谢中起到重要作用。它是尿素生成的中间产物,是精氨酸、瓜氨酸等多种氨基酸代谢的前体物质,主要参与产尿素的鸟氨酸循环中,
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L-鸟氨酸存在于生物体多种组织和细胞中,在生物体代谢中起到重要作用。它是尿素生成的中间产物,是精氨酸、瓜氨酸等多种氨基酸代谢的前体物质,主要参与产尿素的鸟氨酸循环中,对体内集聚的氨具有解毒作用。L-鸟氨酸主要用于制备保肝、护肝、治疗肝病、抗疲劳、抗虚弱等各种复方氨基酸输液。目前制备L-鸟氨酸的方法主要有提取法,化学法,微生物发酵法和酶法。酶法是利用动植物或微生物体内的精氨酸酶作催化剂,水解精氨酸,生成鸟氨酸和尿素。本文研究了酶法生产鸟氨酸的整个工艺流程,包括菌种选育、发酵、转化及分离纯化,试图找到一条有效生产L-鸟氨酸的途径,为鸟氨酸的工业化生产提供思路。本实验从土壤中经过初筛、诱变和复筛得到了一株精氨酸酶活力较高的菌株XT-025。对其进行形态观察、生理生化实验及16S rRNA序列比对,鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。发酵培养基成分为2%葡萄糖,1.2%鱼蛋白胨,0.1%无机盐;菌体在35℃,180 r/min的条件下发酵24 h;在30℃,含有5%精氨酸和0.1 mg/ml的Mn2+的0.3 mol/l碳酸盐缓冲液中转化24 h,最终精氨酸的摩尔转化率可达到90.13%,转化液中鸟氨酸的含量为43.57 g/l。以732型强酸性阳离子交换树脂来分离转化液中的鸟氨酸和精氨酸,上柱液pH=7,使用不同浓度氨水洗脱,最终鸟氨酸洗脱率为98.71%,经后续提纯得到纯度为96.17%的鸟氨酸。整个分离工艺的收率为81.49%。
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