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第一部分血浆游离DNA（cfDNA）浓度和完整性对治疗前后淋巴瘤患者的临床意义目的:检测淋巴瘤患者中血浆游离DNA（cfDNA）水平,观察cfDNA水平与淋巴瘤患者的临床特征及血清中乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）的关系。方法:选择60名初诊淋巴瘤患者及107名治疗后的淋巴瘤患者,收集其外周血标本作为试验组,另外收集93名健康志愿者的外周血作为对照组。采用定量PCR技术检测每组血浆的cfDNA水平及完整性,分析不同组的cfDNA水平,探讨其与淋巴瘤患者临床特征的关系,并对cfDNA和LDH的敏感性和特异性进行分析比较。结果:初诊淋巴瘤患者的cfDNA浓度及完整性显著高于治疗后的淋巴瘤患者;治疗后的淋巴瘤患者cfDNA浓度显著高于对照组,但完整性与对照组无显著差异。患者的年龄、性别、淋巴结外侵犯和淋巴瘤的病理类型与cfDNA的浓度和完整性之间无显著相关性;相反,在初步诊断及治疗后,ECOG评分、LDH含量、Ann Arbor分期、国际预后指数（IPI）、B症状、KI-67表达及放射治疗对cfDNA浓度及完整性存在显著相关性。cfDNA浓度检测是淋巴瘤较好的预测指标,其次是cfDNA完整性检测,两者的敏感性和特异性优于传统的LDH检测。结论:在淋巴瘤患者血浆中,外周血cfDNA含量与健康人群相比有显著提高,与肿瘤负荷密切相关。因此,该指标用于临床可能有助于进一步提高淋巴瘤的诊断水平及治疗疗效的潜在预测指标。第二部分淋巴瘤患者cfDNA水平在化疗前期和化疗中期的差异性研究目的:研究cfDNA浓度及完整性在患者化疗前与化疗中期的差异。方法:收集120名淋巴瘤患者化疗前与化疗中期的外周血液样本,作为实验组,另外90名健康的志愿者被选为健康对照组。利用qRT-PCR检测每组的cfDNA浓度和完整性,对cfDNA与临床特征的相关性进行分析,比较cfDNA、LDH的敏感性和特异性。结果:化疗中期的淋巴瘤患者cfDNA浓度及完整性低于化疗前的淋巴瘤患者,但差异无显著性（P>0.05）,化疗中期的淋巴瘤患者cfDNA浓度显著高于健康对照组（P<0.05）,化疗中期cfDNA完整性高于健康对照组,但差异无显著性（P>0.05）。在化疗前与化疗中期,淋巴瘤患者中cfDNA浓度及完整性与年龄、性别、Ann Arbor分期、FLIPI、淋巴结外入侵和淋巴瘤的病理类型之间无显著相关性（P>0.05）,而与ECOG评分、LDH含量、IPI、IPS、B症状与cfDNA浓度和完整性之间存在显着相关性,即P<0.05。cfDNA浓度和完整性检测可能是一种理想的评价淋巴瘤化疗有效性的指标,其敏感性和特异性高于传统肿瘤生物标志物LDH。结论:淋巴瘤患者化疗中期的cfDNA浓度及完整性低于化疗前,因此cfDNA浓度及完整性可以作为淋巴瘤治疗疗效的潜在生物标志物。第三部分利妥昔单抗联合化疗治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床观察以及cfDNA与疗效的相关性研究目的:探讨利妥昔单抗联合化疗治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床观察以及cfDNA与疗效的相关性研究。方法:收集2011年1月17日-2016年10月17日我院收治的弥漫型大B细胞淋巴瘤患者的血液标本66份。其中34例患者行利妥昔单抗联合化疗方案治疗（R-CHOP）,来自于本中心ML25435临床试验所采集的样本,中位治疗4.73个疗程,男21例,女13例,年龄在17-80岁,中位年龄55岁,Ann Arbor分期I-II期20例,Ⅲ-Ⅳ期14例,IPI低/中低危24例,中高/高危10例;另外32例患者血液样本是来自于同期未进入ML25435临床试验的患者,此类患者行常规方案化疗（CHOP）,中位治疗4.15个疗程,男20例,女12例,年龄在15-79岁,中位年龄48岁,Ann Arbor分期I-II期18例,Ⅲ-Ⅳ期14例,IPI低/中低危24例,中高/高危8例。采用Cheson标准评估疗效及CTCAE v4.0标准评估不良反应。同时采用荧光定量法检测DLBCL患者治疗前后的cfDNA浓度。结果:32例患者完成CHOP治疗,CR 18例（包含CRu病例）;PR 8例;SD 4例;PD 2例;治疗有效率ORR（CR+PR）为81.25%（26/32）。34例患者完成R-CHOP治疗:CR 25例（包含CRu病例）;PR 7例;SD 1例;PD 1例;ORR为94.12%（32/34）。两种治疗方案的ORR率有统计学差异。主要不良反应为骨髓抑制,两种方案的不良反应率相似。患者中位随访时间为16个月（6-60个月）,R-CHOP方案治疗的患者5年生存率是59%,CHOP方案治疗的患者5年生存率是50%。实时荧光定量PCR检测结果表明DLBCL患者治疗前后的cfDNA浓度差异显著,且疗效越好,cfDNA浓度越低,R-CHOP方案降低cfDNA浓度的作用更为显著。结论:利妥昔单抗联合治疗DLBCL的疗效确切,优于CHOP方案,不良反应可以耐受,效果与文献报道一致。CHOP与R-CHOP两种化疗方案治疗DLBCL的疗效R-CHOP组比CHOP组效果更好,不良反应相似,生存率更高。cfDNA浓度与化疗的疗效呈相关性,即疗效越好,cfDNA浓度越低。研究提示,cfDNA能够在一定程度上反映治疗疗效,也更便于监测治疗疗效的变化。