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脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis, Nm)属奈瑟氏菌属,革兰氏阴性菌。由其引起的流行性脑脊髓膜炎发病快,致死率高,后遗症严重,尤其对2岁以下婴幼儿具有很大危害性。在世界范围内仍是一种具有严重危害性的传染性疾病。从60年代以来,Nm对磺胺的耐药现象日益普遍,因此以疫苗为主的预防变得尤为重要。荚膜多糖蛋白结合疫苗对于预防A、C、Y、W135群Nm引起的脑脊髓膜炎起到了重要作用。但由于B群脑膜炎奈瑟氏菌(serogroup B N. meningitidis, MenB)荚膜多糖与人N-乙酰神经氨酸聚合物结构相似,因而不具有免疫原性,所以多糖菌苗的策略并不适用于MenB。因此对于MenB疫苗研发来说,外膜蛋白更值得关注。本研究从脑膜炎奈瑟菌基因组中克隆得到其外膜蛋白NhhA的基因GNA0992,构建pET20b-NhhA重组质粒,在大肠杆菌BL21 (DE3)中实现了可溶性表达,表达量约占菌体蛋白总量的20%。表达蛋白经胶回收纯化,透析,超滤浓缩后,纯度达90%以上,浓度约1.31 ug/ul。Western blot分析结果显示重组蛋白具有较好的免疫原性和抗原性。用纯化的重组蛋白NhhA免疫BALB/c小鼠,对其免疫原性进行了初步分析。结果显示,经过三次腹腔免疫,血清IgG滴度达到23186,同时杀菌力实验显不NhhA能诱导针对B群脑膜炎奈瑟氏菌的补体依赖的杀菌反应。证明了NhhA是一种很好的疫苗候选蛋白。本研究成功构建了Nm外膜蛋白NhhA重组蛋白表达载体,在大肠杆菌中获得了可溶性表达；对重组蛋白表达、纯化等实验条件进行了初步的探索；通过免疫BALB/c小鼠,对该重组蛋白的免疫学效应作了初步的分析,为进一步研究Nm疫苗提供了很好的理论依据和实验资料,也为疫苗开发的蛋白靶标筛选工作奠定了基础。