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目的研究脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）对大鼠肺微血管内皮细胞（ratpulmonary microvascular endothelial cell, RPMVEC）中小窝蛋白-1（caveolin-1,Cav-1）mRNA表达的影响，观察蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）抑制剂对LPS诱导的Cav-1mRNA表达的干预作用，为进一步研究Cav-1在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（acute lung injury/acute respiratory distress syndrome, ALI/ARDS）发病机制中的作用及地位奠定实验基础。方法体外分离培养RPMVEC；分别采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcriptpolymerase chain reaction, RT-PCR）及免疫荧光检测RPMVEC中Cav-1mRNA及蛋白的表达；根据LPS刺激的浓度和时间差异，将RPMVEC随机分为LPS刺激量效组和时效组：量效组分别以0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml LPS与RPMVEC孵育6h，时效组以10μg/ml LPS与RPMVEC分别孵育1h、2h、3h、6h，以上均设置相应对照组； RPMVEC与PKC抑制剂双吲哚基顺丁烯二酰亚胺（bis-indolylmaleimide, BIM）预孵育1h，再与10μg/ml的LPS继续孵育6h，以上设置相应对照组；原位杂交（In situ hybridization, ISH）与JD801形态学图像分析系统检测不同条件下RPMVEC中Cav-1mRNA的表达变化。结果1.体外成功进行RPMVEC的分离、培养，并经形态学及异硫氰酸标记的植物凝集素结合实验鉴定证实。2. RT-PCR和免疫荧光检测出RPMVEC中表达Cav-1基因和蛋白。3. LPS以浓度依赖方式诱导Cav-1mRNA表达增加：0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml LPS分别孵育RPMVEC6h后，Cav-1mRNA表达量随其浓度增加逐渐升高，与正常组比较差异均显著（P <0.05）；10μg/ml LPS刺激RPMVEC不同时间（1h、2h、3h、6h）后，RPMVEC中Cav-1mRNA表达水平呈动态变化：1h开始上升，2h达峰值，之后逐渐下降，但至6h仍高于正常水平（P <0.05）。4.10μmol/L BIM预孵育RPMVEC1h后，可显著下调10μg/ml LPS对Cav-1mRNA表达的诱导效应（P <0.05）。结论1.成功进行RPMVEC的分离、培养和鉴定。2. RPMVEC表达Cav-1。3. LPS以浓度及时间依赖方式上调RPMVEC中Cav-1mRNA的表达。4. PKC抑制剂BIM能够下调LPS对RPMVEC中Cav-1mRNA的诱导效应。