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目的用免疫组化法和荧光PCR法分别检测结直肠癌标本中4种错配修复蛋白(hMLH1、hMSH2、hMSH6及hPMS2)表达缺失情况及微卫星不稳定状态,探讨其与结直肠癌临床病理特征的关系,分析并比较两种方法的一致性,评价IHC法作为Lynch综合征初筛方法的可行性。方法采用EnVision免疫组织化学法检测242例结直肠癌标本中MMR蛋白的表达,分析错配修复蛋白在CRC中的表达情况与病理特征的关系。选取其中的17例(13例MMR蛋白缺失、4例正常)采用荧光PCR法检测微卫星不稳定情况,对比分析两种结果的一致性。结果242例结直肠癌患者组织标本中,错配修复蛋白表达的总缺失率14.04%,其中单独hMLH1蛋白缺失率10.33%(25/242),hPMS2蛋白缺失率11.16%(27/242),hMLH2蛋白缺失率1.2%(3/242),hMSH6蛋白缺失率1.2%(3/242)。hMLH1与hPMS2共同缺失率9.50%(23/242),hMSH2与hMSH6共同缺失率0.83%(2/242)。统计分析显示:在不同性别组中,hMLH1男性患者中缺失率为5.37%(13/242),女性患者缺失率为4.96%(12/242)(P=0.890);hPMS2在男性患者缺失率为5.79%(14/242),女性患者缺失率为5.37%(13/242)(P=0.872);hMSH2、hMSH6在男性患者缺失率均为0.41%(1/242),女性患者缺失率均为0.83%(2/242)(P=0.450);统计分析显示,性别与MMR缺失均无显著差异性。在不同年龄组中,hMLH1在<65岁的患者中缺失率为4.13%(10/242),≥65岁的患者缺失率为6.20%(15/242)(P=0.957);hPMS2在<65岁的患者中缺失率为3.71%(9/242),≥65岁的患者缺失率为7.44%(18/242)(P=0.421);hMSH2、hMSH6在<65岁的患者中缺失率均为0.83%(2/242),≥65岁的患者缺失率均为0.41(1/242)(P=0.359);统计分析显示,年龄与MMR缺失均无显著差异性。在不同淋巴结转移情况组中,hMLH1在转移患者中的缺失为3.30%(8/242),无转移的患者中的缺失为7.02%(17/242)(P=0.485);hPMS2在转移患者中的缺失为3.30%(8/242),无转移的患者中的缺失为7.85%(19/242)(P=0.319);hMSH2、hMSH6在转移患者中的缺失均为1.24%(3/242),无转移的患者均为0(P=0.056);统计分析显示,淋巴结转移情况与MMR蛋白缺失均无显著差异性。在肿物大小组别中,hMLH1在<5cm的患者中缺失为0.83%(5/242),≥5cm的患者中缺失为8.26%(20/242),差异有显著统计学意义(P=0.000);hPMS2在<5cm的患者中缺失为2.48%(6/242),≥5cm的患者中缺失为8.68%(21/242)差异有显著统计学意义(P=0.001);hMSH2与hMSH6在<5cm的患者中缺失均为(0/242),≥5cm的患者中缺失均为1.24%(3/242),无显著差异性(P=0.098)。在不同分化程度组别中,hMLH1在高分化患者中缺失为0.21%(5/242),中低分化患者缺失为0.83%(20/242),差异有显著统计学意义(P=0.043);hPMS2在高分化患者中缺失为0.21%(5/242),中低分化患者缺失为9.10%(22/242)差异有显著统计学意义(P=0.034);hMSH2、hMSH6在高分化患者中缺失均为0.41%(1/242),中低分化患者缺失均为0.83%(2/242),二者比较差异无显著性(P=0.740)。在不同部位分组中,hMLH1在左半结肠患者中缺失为0.21%(6/242),右半患者缺失为0.83%(19/242),差异无显著性(P=0.058);hPMS2在左半结肠患者中缺失为0.21%(6/242),右半结肠患者缺失为9.10%(21/242),差异有显著统计学意义(P=0.029);hMSH2、hMSH6在左半结肠患者中缺失均为0.41%(1/242),右半结肠患者缺失均为0.83%(2/242),无显著差异性(P=0.623)。17例行荧光PCR检测的标本中,13例错配修复蛋白表达缺失的病例中有11例为MSI-H,2例为MSI-L。4例错配修复蛋白表达正常的病例,其荧光PCR检测结果均为MSS。采用Kappa法检验两种方法的检测结果一致性较好(Kappa值为72.1%)。MSI高频不稳定状态(MSI-H)与部位及分化程度有关(P=0.034),差异有显著统计学意义,与性别(P=0.307)、年龄(P=1.000)、大小(P=0.057)、淋巴结转移(P=0.600)无关,差异均无显著性。结论(1)hMLH1与hPMS2、hMSH2与hMSH6常表现为两两协同表达缺失,且以hMLH1、hPMS2蛋白表达缺失更为常见。(2)hMLH1、hPMS2蛋白在结直肠癌中的表达缺失更多见于右侧、分化程度差及瘤体较大的腺癌患者。(3)免疫组化法检测结直肠癌错配修复蛋白表达缺失与荧光PCR法检测微卫星不稳定状态具有较高的一致性,且免疫组化法价格低廉、操作简便,可作为Lynch综合征的初筛方法。图5幅;表7个;参66篇。