一个水稻花发育突变体的基因克隆及功能分析

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水稻是单子叶植物中发育分子生物学研究的模式植物,突变体则是功能基因组学研究的重要材料,因此水稻发育突变体的获得和研究,在揭示水稻发育相关基因的作用及其相互关系,探明植物发育,特别是花发育的奥秘中起着十分重要的作用。近年来有关水稻发育基因调控的研究已取得了长足的进展,通过突变体获得了一系列与水稻发育相关的基因,对高等植物发育调控机制的研究具有重要的意义。我们在本实验室发展的日本晴突变体库中发现的一个水稻花器官突变体,进一步观察整体植株发现从株高、叶以及叶鞘都有差异,其中以花器官的差异最为明显。遗传分析表明该突变体的表型受位于八号染色体上一不完全显性单基因控制,利用图位克隆法精细定位后,推测侯选基因编码--WD40repeat蛋白,并与拟南芥中的TOPLESS基因同源,因此将这个基因暂命名为Ostopless8(Ostp18)。进一步对基因序列测序发现位于BAC AP005504上14053处A>T,从面导致GAG>GTG(Glu>Val).为研究该基因功能构建了互补、GUS、GFP、过表达等载体,其中将突变位点引入野生型日本晴中成功产生了突变体表型,GUS转基因结果显示该基因在各组织中的表达位置,其他载体正在转化中。为进一步了解该基因与其他基因之间的调控关系,本研究还选取了营养生长期野生型、突变体和杂合体叶片组织提取RNA做基因芯片,发现一些可能有关联的基因,并用Realtime-PCR进行验证。Ostpl8基因的克隆与功能分析为进一步了解水稻发育的分子调控机制打下了良好基础。
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