【摘 要】
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目的:PCR体外扩增淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的编码基因,克隆至pUCm-T载体,并对扩增的序列进行分析;构建外膜蛋白PorB的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,分别于天然和变性条
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目的:PCR体外扩增淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的编码基因,克隆至pUCm-T载体,并对扩增的序列进行分析;构建外膜蛋白PorB的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,分别于天然和变性条件下纯化表达产物6Hi s-PorB融合蛋白;检测6His-PorB融合蛋白的免疫活性及其致Hela细胞凋亡活性.结论:1、成功构建了pQE30/porB原核表达载体,将其转化大肠杆菌后能分别以可溶性形式和包涵体形式两种方式表达重组融合蛋白6His-PorB;2、以可溶性形式表达的融合蛋白经天然条件下纯化后,具有生物学活性,能够诱导Hela细胞出现早期凋亡;3、以包涵体形式表达的融合蛋白经变性条件下纯化及复性后,其目的蛋白部分具有较强的免疫原性,可有效地诱导小鼠产生特异性体液及细胞免疫应答.
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