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羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus，ENTV)是羊地方性鼻内腺瘤(Enzootic nasal adenocarcinoma，ENA)的病原，可导致鼻甲骨筛骨上皮细胞的致瘤性转化。ENTV-1感染绵羊，ENTV-2感染山羊。因为缺少感染性分子克隆和无法培养病毒，ENTV在ENA发病机理中的作用尚未被完全揭示，GenBank中收录的ENTV全基因组也很少。在中国该病主要流行于内蒙古、湖南、四川、重庆、陕西等多个省市。为了深入研究ENTV，本研究对陕西省疑似ENA的山羊进行诊断，建立了RT-PCR检测方法，对陕西省不同地区的4株ENTV-2进行全基因分段克隆和序列分析，并制备了Gag和Su蛋白多克隆抗体，获得如下研究结果: 1.对陕西省4个山羊养殖场发生肿瘤的羊通过临床症状观察，剖检和病理学观察，确定该病为山羊地方性鼻内腺瘤。建立ENTV-2的RT-PCR方法，对临床样品进行检测，阳性率为15.5％。 2.通过分段克隆得到陕西省4株ENTV-2的全基因，进行序列比较分析。ENTV-2-Shaanxi1～4全基因和ENTV-2-SC株(登录号:HM104174.1)全基因核苷酸相似度达到98.2～98.7％，和ENTV-2欧洲株(登录号:AY197548.1)相似度达到89.6～89.8％。序列差异部分主要集中在LTR，gag的两个可变区，Orf-x和env的跨膜区(Transmembraneregion，Tm)序列。大部分的氨基酸差异存在于Orf-x，ENTV-2-Shaanxi株和ENTV-2-SC株的Orf-x均含有108个氨基酸，而ENTV-2欧洲株含有166个氨基酸。除了Orf-x，还有Gag蛋白的两个可变区域，ENTV-2-Shaanxi1～4株的可变区1区有6个连续的脯氨酸残基。囊膜蛋白的跨膜区，特别是胞质尾区差异也较大，但胞质尾部中的YXXM基序是很保守的，YXXM是PI3K的结合基序。遗传进化分析表明4个Shaanxi株和已发表的2株ENTV-2亲缘关系最近，特别是SC株。 3.应用PCR分别扩增gag和su基因并和表达载体pET-28a(+)相连，转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株，经IPTG诱导后重组菌成功表达了重组蛋白，将诱导表达的重组蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠，制备多克隆抗体。Western blot分析试验表明，原核表达纯化的Gag蛋白和Su蛋白能够与制得的鼠抗Gag蛋白和鼠抗Su蛋白多克隆抗体抗体特异性结合，而不与患羊的血清结合。