microRNA-21在胆管癌组织中的表达及与上皮间质转化的关系

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胆管癌是一类起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤,其发病率约占总的肝胆肿瘤的10%-15%,且逐年增高。由于在疾病早期阶段缺乏特定的症状,大多数胆管癌患者确诊时已是疾病的晚期,总体预后差,根治性切除能使患者获得最佳疗效,但术后肿瘤复发率高。microRNAs是一类非编码的单链小分子RNA,能够通过调节多种靶基因的表达来控制疾病的发生发展。研究结果亦表明,microRNA-21广泛参与癌症的增殖、侵袭和转移过程,与多种肿瘤患者的临床病理及预后有密切的联系。本研究应用原位杂交检测microRNA-21在胆管癌组织中的表达,并用qRT-PCR检测胆管癌组织中microRNA-21的表达以证实原位杂交的结果,分析其与临床病理因素及患者预后的关系,同时探讨microRNA-21对胆管癌中上皮间质转化(EMT)现象的调控的作用,以期为胆管癌的早期诊断和预后评估提供有参考价值的分子生物学指标。目的:研究microRNA-21及上皮间质转化(EMT)相关标志物在胆管癌组织中的表达及与临床病理因素的关系,进一步探讨microRNA-21在胆管癌中与EMT的关系及其可能的机制。方法:收集安徽医科大学附属省立医院2005年1月到2010年1月手术切除的41例胆管癌标本,10例行胆管癌根治术患者的癌旁组织标本,分别采用原位杂交和免疫组织化学法检测microRNA-21、E-cadherin、N-cadherin等表达,进一步应用qRT-PCR检测胆管癌组织中microRNA-21的表达以证实原位杂交的结果,同时探讨microRNA-21对胆管癌中EMT的调控的作用及机制,分析microRNA-21的表达对临床预后评估的价值。计数资料采用x2检验,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验。结果:胆管癌组织中microRNA-21表达率为63.4%,高于癌旁组织的30.0%,差异有统计学意义(P<0.05);microRNA-21高表达与细胞分化程度、有无淋巴结转移、是否发生神经脉管浸润密切相关(P<0.05),但与患者性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无明显相关(P>0.05)。qRT-PCR结果亦证实microRNA-21的表达与患者有无淋巴结转移、是否发生神经脉管浸润密切相关(P<0.05)。E-cadherin与N-cadherin等表达分别与有无淋巴结转移、是否发生神经脉管浸润相关(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤位置、病理类型及分化程度无明显相关(P>0.05)。同一批胆管癌组织中microRNA-21与上皮间质转化相关标志蛋白E-cadherin、N-cadherin等表达,具有相关性(r=0.373,0.614,6.617,0.264,P<0.05)。术后生存分析结果显示,microRNA-21低表达患者总体生存率及无瘤生存率均高于microRNA-21高表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:microRNA-21在胆管癌组织中高表达,其可能是通过诱导EMT的发生来促进胆管癌的浸润和转移,且其有望作为一种预后指标应用于临床评估。
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