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目的探讨ASC(Apoptosis -associated Speck-like protein containinga CARD)基因在卵巢癌细胞株及组织中的甲基化状态及该基因表达在卵巢癌发病机制中的作用。方法选取人卵巢癌细胞株A2780,SKOV3,Anglne,CAOV3,OVCAR3,SW626,COC1,以及18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR, MSP)检测卵巢癌细胞株以及卵巢癌组织中ASC基因启动子区域甲基化的状态,用RT-PCR和Western Blot方法分别检测其mRNA和蛋白的表达。结果1. 4/7株卵巢癌细胞(A2780,SKOV3,Anglne,SW626)中检测出ASC基因的异常甲基化。发生甲基化的细胞株与未发生甲基化的细胞株ASC基因的mRNA和蛋白表达相比较下降明显。2.7/18例卵巢癌组织中检测出ASC基因的异常甲基化,而10例正常卵巢组织中均未发现ASC甲基化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌中存在ASC基因甲基化,这可能是导致该基因沉默的重要原因,并在卵巢癌的发病机制中起作用。目的探讨DNA5’CpG岛去甲基化对SKOV3卵巢癌细胞株ASC基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响。方法用特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2,-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用卵巢癌细胞株SKOV372h后,甲基化特异性PCR(MSP)检测ASC基因启动子区域甲基化的状态,四唑盐(MTT)比色、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Westernblot)检测用药前后SKOV3细胞株生长倍增时间以及对ASCmRNA及蛋白表达的影响。结果(1)未经5-氮-2,-脱氧胞苷处理的SKOV3细胞株呈甲基化阳性,而经5-氮-2,-脱氧胞苷处理的SKOV3细胞株呈非甲基化阳性。(2)与对照组相比,3组不同5-氮-2,-脱氧胞苷浓度均能明显抑制肿瘤细胞生长,倍增时间分别增加了1.14、1.31和1.43倍。(3)经5-氮-2,-脱氧胞苷处理后,ASC基因mRNA和蛋白表达明显增加。结论特异性甲基转移酶抑制剂5-氮-2,-脱氧胞苷能较好地逆转SKOV3细胞DNA异常甲基化,并有效地激活因高甲基化所致ASC基因沉默的再转录,诱导该基因的表达,并抑制SKOV3细胞生长。