慢性乙型肝炎患者肝组织中程序性死亡分子-1的表达与中医辨证分型及临床相关指标关系的研究

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目的探讨不同病情程度慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,C H B)患者肝组织中程序性死亡分子-l(program m ed death-1,PD-1)的表达特点及与肝脏炎症分级、纤维化分期、A L T、A S T、T B IL和H B V D N A水平的关系,并通过对C H B患者进行中医辨证分型基础上,分析不同中医证型C H B患者肝组织中PD-1表达情况。方法选择2〇13年8月至2014年1月在安徽中医药大学第一附属医院感染科住院的1〇〇例慢性乙型肝炎患者为研究对象,将纳入的100例C H B患者进行中医辨证分型,分别为肝郁脾虚型、湿热中阻型、瘀血阻络型、脾肾阳虚型和肝肾阴虚型,其中将湿热中阻型和瘀血阻络型归为偏实证组,另外3型归为偏虚证组,所有患者均行肝组织穿刺活检术以进行肝脏病理学诊断,肝组织中PD-1的表达采用免疫组织化学SP法来检测,并用Im age-Pro Plus 6.0图像分析系统对阳性表达区域进行测量,计算表示PD-1表达的平均光密度(m ean optical density,M O D)值,并以同期住院的5例肝血管瘤患者作为对照组,分析不同病情程度肝组织中PD-1的表达特点及与中医证型、相关临床指标的关系。结果共有100例C H B患者纳入本研究.①免疫组化染色结果显示,可见PD-1在正常对照组中基本无表达或极弱阳性表达,而在C H B患者肝组织中有不同程度的阳性表达;其中炎症分级G l、G 2、G 3、G 4组别的肝组织中PD-1表达的M O D值士s)分别为0.15±0.10,0.27±0.02,0.33±0.01和0.4 2±0.0 2;纤维化分期SO、S l、S 2、S3、S4的肝组织中PD-1表达的M O D值(J士s)分别为0.00士0.0 0,0.22±0.06,0.29±0.26,0.34±0.〇2和0.43±0.2 5;轻度慢性乙型肝炎(C H L)、中度慢性乙型肝炎(C H M)、重度慢性乙型肝炎(C H H)三组肝组织内P D-1表达的M O D值(I士s)分别为0.24±0.07,0.34±0.02,0.42±0.02。经秩和检验结果显示,不同组别间PD-1表达比较,具有统计学差异(P<0.0 5),其表达量与肝脏炎症分级、纤维化程度均呈正相关,相关系数分别为〇.826(尸<0.001)和0.822(尸<0.001)。②不同组别间A L T、A ST水平比较,具有统计学差异(P<〇.〇5);各组间TB IL水平比较:对照组与C H L组及C H M组比较,具有统计学差异(户<〇.〇5);其他各组间比较,无统计学差异(P>0.0 5);各组间HBV D N A水平比较:对照组与C H L组、C H M及C H H三组比较,具有统计学差异(P<0.0 5);其余各组间比较,无统计学差异(P>0.0 5);经P earson线性相关分析显示,肝组织中PD-1与A L T、A S T、TBIL及H B V D N A水平均呈正相关,相关系数分别为0.472(P<0.0 0 1)、0.414C/5<0.0 0 1)、0.332CP<0.0 5)、0.463(P<0.05)。③中医证型的变化与肝脏病理变化有着一定相关性,其中湿热中阻型、肝郁脾虚型病例分布以G 1?G 2、S0?S 2为主,两组间比较,无统计学差异(尸>〇.〇5);瘀血阻络型病例分布以G3?G 4、S3~S4为主,与湿热中阻型、肝郁脾虚型比较,具有统计学差异(户<0.05)。不同证型间PD-1表达各有差异,其中肝郁脾虚型最低,瘀血阻络型最高;肝郁脾虚型与湿热中阻型、瘀血阻络型比较,具有统计学差异CP<〇.〇1),与其余三组比较,无统计学差异(P>〇.〇5);通过将湿热中阻型和瘀血阻络型归为偏实证组,另外3型归为偏虚证组,结果显示PD-1表达在偏实证组明显高于偏虚证组,两组间比较,具有统计学差异(P<〇.〇1)。结论不同病情程度C H B患者肝组织中PD-1表达是不同的,随着病情程度的加重,其表达量增加,相关性分析显示,PD-1表达与肝脏炎症活动度、纤维化程度呈正相关,与外周血生化指标(A L T、A S T、TB IL)和H B V D N A水平具有相关性,与中医辨证分型及虚实证也有一定的相关性。肝组织中PD-1的表达与病情的慢性化进展有密切关联,检测肝组织中PD-1表达有望为C H B中医辨证分型、临床诊断、中西医结合治疗等方面提供客观的依据。
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