【摘 要】
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口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,主要侵害猪、牛、羊等偶蹄动物,疾病的发
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口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,主要侵害猪、牛、羊等偶蹄动物,疾病的发生对畜牧业造成巨大损害。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须通报的传染病,我国也将其列在一类传染病之首。目前,接种疫苗是防控FMD的有效手段,FMD灭活疫苗在FMD的防控过程中发挥着不可替代的作用。常规灭活疫苗是毒株经病毒培养扩增,灭活剂处理后添加佐剂制成的,其生产过程存在灭活不完全和散毒的风险。病毒空衣壳包含了完整病毒上的所有免疫显性位点,且不含核酸成分,因而具有更高的安全性,是一种能替代灭活病毒制造疫苗的新型免疫原。本研究以近年来流行的O型FMDV缅甸98株(O/MYA98/BY/2010株)为研究对象,构建了表达缅甸98株衣壳蛋白的杆状病毒,并通过查阅相关文献和参照本实验室FMDV O型ON株酸化培养的结果,进一步构建了两组在FMDV P1序列包含不同耐酸定点突变的衣壳蛋白表达重组杆状病毒。三组重组杆状病毒感染Sf9昆虫细胞成功表达并收集重组衣壳蛋白,通过间接免疫荧光试验、蛋白免疫印迹、双抗夹心酶联免疫吸附试验等多种方法检测到重组衣壳蛋白的表达,且具有良好的抗原性。经过耐酸定点突变的两组衣壳蛋白也表现出相应的耐酸作用。将重组衣壳蛋白混合GEL佐剂制成疫苗,免疫小鼠后能够刺激机体产生与灭活疫苗一致甚至更高的抗体水平,免疫豚鼠攻毒保护试验则表明,三组重组衣壳蛋白制成的疫苗能够发挥与灭活疫苗相似或更好的保护作用,试验进一步证实了空衣壳疫苗作为新型疫苗的可行性,为构建耐酸FMDV衣壳蛋白及其空衣壳疫苗的深入研究提供参考。
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