论文部分内容阅读
研究目的： 检测卵巢癌组织及正常卵巢组织中miR-181a的表达量并分析卵巢癌组织中miR-181a的表达与患者临床特征之间的关系，为卵巢癌的病因探讨提供理论支持。 材料与方法： 1.选取广州军区广州总医院妇科2011-2013年治疗的30例卵巢恶性肿瘤患者的卵巢组织为卵巢癌组，选取同期行手术治疗病理诊断卵囊巢浆液性或粘液性囊腺瘤行卵巢切除的卵巢组织为对照组。 2.提取两组患者卵巢组织中的总RNA后通过microRNA茎环引物进行逆转录，实时荧光定量PCR（q-PCR）技术检测正常组织与卵巢癌组织中miR-181a的表达. 3.分析卵巢癌组患者不同临床特征中miR-181a的表达差异。 4.分析卵巢癌患者CA-125与miR-181a表达量的相关性。 5.分析卵巢癌患者miR-181a的表达对于卵巢癌诊断的特异性及敏感性。 6.分析卵巢癌患者miR-181a的表达与患者累及生存时间的关系。 结果： 1.总RNA的提取效果及PCR产物电泳图D260/D280比值在1.9-2.1之间，D260/D230比值大于1.0，三条带明显可进行下一步实验。 2.real-time PCR产物溶解曲线单峰，扩增曲线均达平台期，说明miR-181a茎环引物及内参U6引物可特异性扩增miR-181a及U6片段。 3.卵巢癌组平均ΔCt值（5.498±1.604）；对照组平均ΔCt值（9.864±1.291），两组差异有统计学意义（t=-11.731，P<0.01）。相对对照组卵巢癌组miR-181a的相对表达量（2-ΔΔCt）是20.620±1.242。 4.患者卵巢癌组织中miR-181a表达量的变化与年龄无明显关系，差异无统计学意义（t=1.162，P=0.262）；浆液性卵巢癌与粘液性卵巢癌的中miR-181a表达量无明显关系，差异无统计学意义（t=1.687， P=0.103）；中、低分化组织卵巢癌miR-181a的表达明显高于高分化，差异有统计学意义（t=2.719，P=0.011）；病理分期Ⅲ、Ⅳ期的卵巢癌患者miR-181a表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期，差异有统计学意义（t=2.808，P=0.019）；存在淋巴转移的患者miR-181a表达明显高于无淋巴转移的患者，差异有统计学意义（t=2.624，P=0.018）；术前CA-125>1000μmol/L的患者miR-181a表达明显高于CA-125<1000μmol/L的患者，差异有统计学意义（t=2.937，P=0.007）；腹水量>1000ml的患者miR-181a的表达明显高于腹水量<1000ml的患者，差异有统计学意义（t=3.405，P=0.005）。 5.相关性分析显示：CA-125与miR-181a成正相关（相关系数 r=0.8150），随着CA-125的增高的miR-181a的表达量逐渐升高。 6. ROC曲线显示：miR-181a的曲线下面积小于 CA-125，诊断敏感性及特异性均高于CA-125。 7. miR-181a表达量小于21.0的患者与miR-181a表达量大于21.0，Kaplan-Meier生存率估计结果显示两组平均生存时间为22个月与16个月（Breslow检验χ2=11.482，P=0.001，两条生存曲线差别有统计学意义）。miR-181a表达量小于21.0的患者生存率大于miR-181a表达量大于21.0的患者。 结论： miR-181a可能参与卵巢癌的发生、发展。卵巢癌患者血清CA-125与卵巢组织miR-181a的表达量成正相关。miR-181a作为卵巢癌的一个诊断指标其敏感性及特异性均高于CA-125，miR-181a与患者术后累及生存时间有相关性，可能作为一个卵巢肿瘤的诊断及预后的标志物。