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在本实验室前期工作中，从人胎脑cDNA文库中筛选到一个新cDNA克隆，因与大鼠Neurotrimin基因同源性很高，因此命名为Human Neurotrimin(HNT)。HNT在脑中高表达，属于免疫球蛋白超家族成员，具有三个免疫球蛋白结构域，属于没有跨膜区和胞内区的GPI锚蛋白。目前发现HNT的主要功能为细胞黏附和促进神经突触生长。我们在点杂交实验中发现HNT在神经系统肿瘤中存在表达下调的趋势，于是推测该基因可能与胶质瘤形成有关。我们应用Realtime PCR的方法检测了20例胶质瘤病理样本和6株胶质瘤细胞，发现HNT在70％(14／20)胶质瘤组织和全部六种细胞系中明显表达下调。考虑低表达可能由表观遗传学修饰引起，分别用甲基化转移酶抑制剂(5-aza-2-deoxycytidine)和去乙酰酶抑制剂(TSA)处理胶质瘤细胞后发现甲基化转移酶抑制剂处理后HNT表达上调，推测HNT在胶质瘤中低表达可能由于启动子区CpG岛甲基化。我们用Bisulfite Sequcing实验证明HNT启动子区CpG岛在胎脑中处于非甲基化状态，而在T98G细胞中存在部分甲基化现象。为了证明甲基化引起基因表达下调，我们又应用荧光素酶报告基因(Luciferase Assay)方法寻找HNT的核心启动子区，确认-606～-136bp可能是基因的核心启动子区。该区域刚好是发生甲基化的CpG岛所在区域，并存在Sp1结合位点，于是我们希望探索Sp1对于HNT转录激活的作用，进一步研究HNT的转录调控机制。在上述工作基础上，我们在细胞整体水平上研究HNT对胶质瘤细胞增殖的影响。我们将空病毒(Ad)和表达HNT的腺病毒(Ad-HNT)分别感染U251细胞，发现感染Ad-HNT后，细胞周期被阻滞在G1期。进而研究HNT可能影响的CDK和CDKI因子，半定量PCR发现p21，p16和p19可以被HNT其激活，接着应用westernblot检测蛋白水平的变化，发现p21，p27被明显上调。同时，我们发现HNT可以抑制活性状态HNT并抑制cyclin E表达水平。因此，HNT可能通过抑制活性状态CDC42表达，再抑制下游的cyclin E，而上调p21，p27来阻滞细胞周期的，暗示了HNT可能是通过抑制细胞增殖而抑制胶质瘤发生的。