[目的]　　 真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E),是蛋白质合成起始阶段的重要调控因子。该起始因子在多种头颈部肿瘤细胞和组织中不仅高表达,而且与预后呈负相关。同时,eIF4E的过表达状态还可能与鼻咽癌的发生、发展及其放疗耐受密切相关。本研究拟探讨化学合成siRNA对人鼻咽癌CNE-2Z细胞株eIF4E基因表达的抑制作用以及对靶细胞体外增殖活性、细胞周期、细胞凋亡的影响。从而为eIF4E基因成为鼻咽癌治疗的新靶点提供实验性研究基础。　　 [方法]　　 (1)利用免疫细化方法检测人鼻咽癌CNE-2Z细胞中eIF4E蛋白表达情况。　　 (2)通过脂质体法将FAM标记的阴性对照siRNA转染CNE-2Z细胞评价转染效率。　　 (3)将5对靶向eIF4E基因的siRNA转染人鼻咽癌CNE-2Z细胞,同时设立NC阴性对照组、Mock组(转染试剂对照组)、空白对照组(Blank组)。转染48小时后通过Real Time PCR和Western blot检测eIF4E mRNA和蛋白的表达情况,筛选出抑制效率最高的siRNA。　　 (4)以干扰效率最高的siRNA转染人鼻咽癌CNE-2Z细胞,通过Western blot检测转染后24h、48h、72h eIF4E蛋白表达水平的变化,采用CCK-8法及流式细胞术(FCM)分别检测eIF4E基因对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。　　 [结果]　　 (1)eIF4lE蛋白在人鼻咽癌CNE-2Z细胞中高表达。　　 (2)转染后6h的细胞在荧光显微镜下观察显示转染效率约80％,已达进一步实验要求。　　 (3)转染后48h,Real Time PCR与Western blot结果均表明siRNA-5组抑制效率最高,分别为78.0%和82.0%,差异有显著意义(P＜0.01)。　　 (4)转染siRNA-524h、48h、72h后,eIF4E蛋白表达抑制率分别为29.7%、78.0%、97.0%,较阴性对照组明显降低,差异有显著意义(P＜0.01)。　　 (5)转染siRNA-5后24h、48h、72h,细胞增殖抑制率分别为4.17%、26.19%、17.92%,其中48h、72h抑制率较阴性对照组明显降低,差异有显著意义(P＜0.01)。　　 (6)转染siRNA-548h后G0/G1期细胞比例增加了17.52%,S期细胞比例减少了17.13%,差异具有统计学意义(P＜0.01)。　　 (7)转染siRNA-548h后CNE-2Z细胞未见明显凋亡(P＞0.05)。　　 [结论]　　 (1)针对eIF4E基因的siRNA可以有效地抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞株中eIF4E基因的表达。　　 (2)siRNA干扰eIF4E基因能降低人鼻咽癌CNE-2Z细胞的体外增殖能力。　　 (3)siRNA干扰eIF4E基因能使人鼻咽癌CNE-2Z细胞的DNA合成下降(S期细胞分布比例降低),细胞周期阻滞于G0/G1期。