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目的：1.评价穴位电刺激对失负荷性肌萎缩和骨丢失的抑制作用；2.通过研究穴位电刺激对细胞凋亡的干预作用,探索穴位电刺激对失负荷性肌萎缩和骨质丢的作用机制。
方法：1.10周龄雄性Balb/c小鼠12只,平均体重23.57±0.17g;按体重配对原则随机分为实验组6只,正常对照组6只,实验组小鼠6只。实验组采用Morey-Holton和Globus的方法30度悬吊小鼠,随机选取一侧后肢给予穴位电刺激治疗,另一侧作为失负荷对照组。14天后,将小鼠迅速脱臼处死,称重；分离比目鱼肌和趾长伸肌,精确称取肌肉重量、测定最大肌张力、肌纤维最优长度；分离股骨和胫骨,分别于股骨中段、股骨和胫骨干骺端测定骨密度,骨骼的最大载荷、弹性模量。 2.将比目鱼肌和趾长伸肌冷冻、包埋,分别于比目鱼肌和趾长伸肌的肌腹部连续切片做HE染色,计算肌纤维平均横截面积；末端dUTP标记法(TUNEL)检测凋亡肌纤维,计算肌纤维凋亡指数；免疫荧光双染法标记肌纤维凋亡信号转导通路的相关蛋白,其中包括1)膜受体介导的信号转导通路的Caspase-8蛋白的表达；2)内质网介导的信号转导通路的的Caspase-12蛋白的表达；线粒体介导的信号转导通路的Caspase-3、Bax、Bcl-2和细胞色素C的表达以及Caspase非依赖性信号转导通路凋亡诱导因子(AIF)的表达 结果：
1.穴位功能电刺激可以抑制失负荷性肌萎缩和骨丢失,与失负荷对照组相比,比目鱼肌的肌肉重量和体重校正的重量指数分别提高了18.97％(P＜0.01)和18.52％(P＜0.01)：肌纤维横截面积增加了～20％(P＜0.05);功能穴位电刺激同时改善比目鱼肌的收缩功能,与失负荷对照组相比,比目鱼肌等长收缩最大肌张力提高了～48.17％(P＜0.01)：单位横截面积的最大肌力提高了～30.47％(P＜0.001);肌肉的最优长度增加了9.82％(P＜0.05);改善了肌肉对频率的反应性；同时,股骨、胫骨干骺端松质骨骨密度在电刺激后改善明显,与失负荷组相比,胫骨干骺端的松质骨骨密度增加了38.49％(P＜0.05),胫骨和股骨的弹性模量分别提高了23.25％(P＜0.05)和35.56％(P＜0.05)。
2.低频电刺激可以改善比目鱼肌肌纤维核凋亡指数的增加,与失负荷组比较,低频电刺激组比目鱼肌肌纤维核的凋亡指数下降了大约48.8％(P＜0.01)。在肌纤维凋亡信号转导通路的研究中,线粒体凋亡信号转导通路通路相关蛋白的表达显著提高,与正常对照组相比,Caspase-3的表达提高了88.54％(P＜0.001);细胞色素C(Cytochrome c)的表达提高了；Bax和Bcl-2蛋白的表达提高了129.5％(P＜0.001)和22.9％(P＜0.05)。此外,作为caspase蛋白非依赖性的凋亡诱导因子(AIF)的表达提高了76.4％(P＜0.001);作为膜受体介导信号转导通路的caspase-8和内质网介导的信号转导通路的caspase-12的阳性表达在本实验并没有被观察到。
结论：1.穴位电刺激对失负荷性肌萎缩和骨丢失有显著的抑制作用；2.通过干预肌纤维的凋亡和凋亡信号转导通路是穴位电刺激抑制失负荷性肌萎缩和骨丢失重要机制。