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猪瘟（classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）引起的一种高度接触性和致死性传染病，以高热稽留、广泛性出血和免疫抑制为主要特征，被世界卫生组织（OIE）列为须申报的动物疫病名录。E2蛋白是猪瘟病毒粒子表面的一种囊膜糖蛋白，是诱导机体产生中和抗体的最主要抗原，同时也是介导CSFV感染易感细胞的主要分子。为了筛选与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白，我们构建了酵母双杂交诱饵表达质粒pGBK-E2，与猪肺泡巨噬细胞酵母表达文库（克隆至酵母双杂交捕获物表达载体pGADT7）杂交，筛选得到一种与CSFV E2蛋白相互作用的新蛋白，即激活的蛋白激酶C1受体（receptor of activatedprotein kinase C1，RACK1）。RACK1蛋白是一种富含WD（色氨酸和天冬氨酸）的蛋白，含有7个WD重复基序，它能够与激活的蛋白激酶C相互作用，并使其锚定在底物附近的细胞膜上。为了验证E2和RACK1之间的相互作用，我们将E2表达质粒和RACK1表达质粒共转化酵母菌Y2H，获得了在SD/-4和SD/-4/X/A平板上生长的阳性克隆，表明E2和RACK1在酵母体系中存在相互作用。然后，用细菌表达的GST-E2融合蛋白与瞬时表达Myc-RACK1融合蛋白的HEK293T细胞裂解物进行GST pull-down试验，结果表明，E2能够在体外共沉淀RACK1。同时，我们将E2表达质粒和RACK1表达质粒共转染HEK293T细胞，利用共聚焦激光扫描显微镜证实了E2和RACK1共定位于细胞浆。将一系列表达截短RACK1的酵母重组质粒和pGBK-E2共转化酵母菌Y2H，结果显示，RACK1的WD6-7结构域是与E2蛋白相互作用的最小区域。同时我们发现，CSFV感染猪外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）中的RACK1蛋白表达量显著下降，表明CSFV可能下调PBMC中RACK1蛋白的表达。总之，本研究鉴定了与CSFV E2蛋白相互作用的宿主蛋白RACK1，确定RACK1的WD6-7是与E2蛋白相互作用的关键区域，且CSFV感染能使PBMC中RACK1蛋白的表达显著下降。