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目的通过构建脑缺血再灌注损伤的在体和细胞模型,研究脑缺血再灌注后海马CA1区上皮特异性ETS-1 (ESE1)的表达情况,探讨其对神经元凋亡可能的作用机制。方法采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,将健康雄性大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注6h、12h、24h、48h、72h组。采用Western blot方法检测ESE1、NF-κB活化指标磷酸化p65(p-p65)及凋亡指标active caspase3蛋白在脑缺血再灌注不同时间点海马组织的表达情况；用免疫组织化学方法进一步研究ESE1在脑内海马CA1区的表达情况；通过免疫荧光双标法明确脑内ESE1在脑缺血再灌注后海马组织脑细胞中的定位情况,以及与神经细胞凋亡标记物active caspase3的关系。同时采用二氯化钴(COC12)刺激PC12细胞建立神经元化学缺氧性损伤模型,检测细胞缺氧后ESE1、p-p65和active caspase3蛋白表达的变化,随后构建ESE1 RNA干扰载体抑制PC12细胞中ESE1的表达,检测刺激后凋亡指标active caspase3、p-p65等指标的变化。结果(一)在体实验：①利用western blot发现ESE1、p-p65蛋白在假手术组中表达较低,脑缺血再灌注后6h表达开始上调(P<0.05),24h达到高峰(P<0.05),随后表达逐渐下降但仍高于假手术组水平(P<0.05)；active caspase3蛋白在假手术组中表达很低,缺血再灌注后6h表达增多(P<0.05),并逐渐升高,48h达到高峰(P<0.05),随后表达有所回落但仍高于假手术组水平(P<0.05)。②利用免疫组织化学方法结果显示,假手术组海马CA1区ESE1蛋白表达较低;与假手术组相比较,在脑缺血再灌注后24h海马CA1区ESE1蛋白阳性细胞数明显增多,表达增加,有显著性差异(P<0.05)。③利用免疫荧光双标法,结果显示脑缺血再灌注24h海马组织NeuN表达(+)细胞中ESE1表达为(+),GFAP表达(+)细胞中ESE1表达为(-),Iba表达(+)细胞中ESE1表达为(-),ESE1表达(+)细胞中active caspase3表达为(+)。(二)离体实验：采用western blot方法发现正常对照组ESE1、p-p65和active caspase3蛋白表达较低,与正常对照组相比较,ESE1、p-p65和active caspase3蛋白表达在COC12刺激PC12细胞1h后开始增多(P<0.05),逐渐上升,12h达到高峰(P<0.05),随后下降但仍高于正常对照组(P<0.05)；在干预PC12细胞中ESE1表达后,p-p65及active caspase3蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论全脑缺血再灌注后海马组织CA1区ESE1蛋白表达显著增高,可能通过激活NF-κB信号通路参与脑缺血再灌注后神经元凋亡的过程。通过干扰ESE1的表达可以抑制大鼠全脑缺血模型中神经元凋亡的发生,起到神经保护作用。本研究为脑缺血再灌注损伤治疗提供了新的靶点。