非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASF virus,ASFV）引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染病,病死率高达100%。2018年,该病在我国首次暴发,并迅速在国内蔓延流行,给国内的生猪生产造成了极大的经济损失。目前,ASF仍然反复发生,防控形势十分严峻。ELISA是快速检测、筛查和净化ASFV感染猪的重要技术手段,但国内尚缺乏理想的ELISA检测试剂盒。本研究旨在建立ASFV-p30和p72抗体检测ELISA方法,比较两者的检测结果,为ASFV的血清学检测提供重要技术支撑。本研究首先合成了 ASFV p30和p72基因,构建了 p30和截短p72（p72s）重组原核表达质粒pET28a-p30和pET28a-p72s,在IPTG诱导下,表达了预期大小为30 kDa和42 kDa的重组蛋白;经Western blotting鉴定和液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）分析,证明所表达的蛋白分别为目的蛋白;用p30与p72s分别免疫BALB/c小鼠,小鼠的特异性抗体效价最高分别为1:102400和1:409600。分别以p30和p72s为抗原建立了间接ELISA（p30-或p72s-ELISA）方法,优化了抗原、待检血清（一抗）和酶标抗体（二抗）的工作浓度及反应条件,筛选了封闭液,确立了阴阳性临界值,检测了方法的特异性和敏感性,评价了方法的重复性,分析了 p30-ELISA与p72s-ELISA以及建立ELISA与商品ELISA试剂盒检测结果的符合率,并应用Western blotting验证建立方法的检测结果。结果显示,p30和p72s的最佳包被浓度分别为1.0 μg/mL和0.5 μg/mL,一抗的最佳稀释倍数均为1:100倍,二抗的最佳稀释倍数均为1:5000,最适封闭液均为含5%脱脂奶粉PBST;37℃下,一抗和二抗的最佳反应时间分别为1 h和45 min;p30-ELISA和p72s-ELISA的临界值分别为0.294和0.365,两种方法与CSFV、PRRSV及PRV等抗血清均无交叉反应;p30-和p72s-ELISA检测相同血清的特异性抗体效价分别为1:3200和1:1600,均高于商品试剂盒检测的抗体效价（1:800）;批内重复性试验的平均变异系数（CV）分别为4.723%和4.7%,批间重复性试验的CV分别为4.923%和5.615%。建立的ELISA方法与Western blotting的检测结果具有很好的一致性,与试剂盒的阳性符合率均为100%（40/40）,阴性符合率均为35.71%（30/84）,总符合率均为56.45%（70/124）。最后,分别用p30-和p72s-ELISA检测了 790份血清样本。结果显示,p30-与p72s-ELISA 的总阳性检出率分别为 77.47%（612/790）和 77.22%（610/790）,两者的检测结果具有很好的一致性（Kappa=0.993,p＜0.001）。