靶向作用喉癌候选抑瘤基因LCRG1的microRNAs的初步筛选研究

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目的:筛选靶向调控喉癌候选抑瘤基因LCRG1的microRNAs。方法:利用生物信息学miRNA靶基因预测软件PITA,预测能调控LCRG1的miRNAs;采用Real-time PCR检测筛选出来的5个候选miRNAs在29对喉癌组织和对应喉正常组织的表达。构建LCRG1基因3’UTR荧光素酶报告基因载体,通过双荧光素酶活性测定,初步分析可能调控LCRG1基因表达的miRNAs。结果:miRNA靶基因预测软件PITA针对LCRG13’UTR预测能调控LCRG1的miRNAs有649个;根据生物信息预测结果和文献分析筛选出5个miRNAs:miR-21,miR-181d,miR-193b,miR-222,miR-1264,在29例喉癌组织显示上调的有:miR-21,miR-222,miR-1264,有统计学意义。然后针对这5个候选miRNAs与LCRG13’UTR的结合位点构建重组LCRG1基因3’UTR荧光素酶报告基因载体,并通过双荧光素酶活性测定,初步分析miR-21,miR-181d,miR-1264能使LCRG13’UTR荧光素酶的活性显著性降低,有统计学意义。结论: miR-21,miR-181d,miR-1264可能参与调控喉癌候选抑瘤基因LCRG1的表达。
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