分子超声造影成像评估动脉粥样硬化小鼠升主动脉炎性损伤的实验研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenzhixian
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目的:血管黏附分子的高水平表达是动脉粥样硬化病变炎症损伤的重要环节。血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)作为重要的黏附分子之一,其表达上调不仅是血管内皮损伤的早期分子标志,而且其表达水平能够在一定程度上反映内皮炎性损伤的程度。本研究利用携 VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡,动态观察这种靶向微气泡对不同病变阶段的动脉粥样硬化病变特异分子表型的检测能力,探讨超声造影成像中特异性分子信号强度与VCAM-1表达以及炎性损伤变化之间的关系。  方法:62只高脂饮食喂养的雄性载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠作为年龄依赖性动脉粥样硬化病变模型,另54只普通饲料喂养的雄性C57BL/6J小鼠作为对照实验动物。实验动物分别于8、16、24、32周龄,采用超声造影成像观测小鼠近端升主动脉内携VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡的特异性显影增强效果;荧光显微镜下离体观察靶向微气泡对主动脉动脉粥样硬化病变的特异性粘附作用;获取近端升主动脉组织进行H&E染色、Mac-2染色以及Western Blot分析,评估各周龄组小鼠动脉粥样硬化病变进展程度、单核/巨噬细胞浸润程度以及VCAM-1的表达水平。  结果:高脂饮食喂养的ApoE基因敲除小鼠,其动脉粥样硬化病变呈年龄依赖性进展,8周龄时动脉内膜可出现散在的脂肪纹,至32周龄即可见广泛的动脉粥样斑块形成;超声造影成像中,ApoE基因敲除小鼠近端升主动脉内携VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡的信号强度均显著高于同龄对照组小鼠;ApoE基因敲除小鼠中,自8周龄至32周龄组,近端升主动脉内靶向微气泡信号强度逐渐增强,依次为3.44±0.39dB、5.02±1.31dB、10.03±1.96dB、23.9±3.9dB,各组间具有统计学差异;ApoE基因敲除小鼠近端升主动脉VCAM-1的表达水平以及单核/巨噬细胞浸润的范围亦呈年龄依赖性的增加,表明炎症损伤程度的进行性加重。对照组C57BL/6J小鼠中靶向微气泡信号强度、升主动脉VCAM-1的表达水平以及单核/巨噬细胞浸润范围在各周龄组间均无显著性差异。  结论:应用携VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡的分子超声造影显像技术不仅能够实现活体内早期检测动脉粥样硬化病变特异性黏附分子的高水平表达,而且还能量化评估主动脉内特异性黏附分子的表达水平,客观反映不同病变阶段动脉粥样硬化病变炎症损伤的程度。
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