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目的:探讨抑癌基因PTEN蛋白在骨肉瘤中的表达及意义,分析PTEN在不同组织学分级的骨肉瘤中的表达水平,确定PTEN蛋白可否作为骨肉瘤的诊断标志物,以及将PTEN表达的异常程度作为指导骨肉瘤分级参考指标的临床应用价值。 方法:以43例骨肉瘤存档手术标本为研究对象,30例骨良性病变(骨软骨瘤)手术切除标本作为对照组。应用ElivisonTM二步法免疫组织化学检测PTEN蛋白在43例骨肉瘤[包括高分化骨肉瘤(Ⅰ~Ⅱ级)23例和低分化(Ⅲ级)骨肉瘤20例]的表达情况。阴性对照用PBS代替抗PTEN抗体,阳性对照为已知阳性的高分化肺鳞状细胞癌。阳性表达以胞质内出现明显的棕色颗粒为判断标准,每例随机计数5个高倍视野的PTEN阳性表达的瘤细胞,并计算其阳性表达的百分率。(1)阴性(-):无阳性瘤细胞或阳性瘤细胞数<10%;(2)阳性(+):阳性瘤细胞占10%~40%;(3)阳性(++):>40%。统计分析采用SPSS10.0统计软件包,进行x2检验,分析比较PTEN在骨软骨瘤和骨肉瘤表达的关系及骨肉瘤不同病理分级之间的PTEN表达的差异。使用Spearman等级相关分析方法分析骨肉瘤组织学分级与PTEN表达强度的关系。在PTEN表达阳性的细胞中,随机选取50个细胞,利用Vidas显微图像分析系统进行PTEN表达的半定量测定,对各病例组测得的光密度值进行单因素方差分析。 结果:免疫组织化学染色显示PTEN蛋白阳性反应均定位于胞浆,呈棕色或棕黄色颗粒。30例骨良性病变中PTEN蛋白阳性表达率为83.3%,43例骨肉瘤PTEN蛋白阳性表达率为51.2%,经Pearson卡方检验,两者差异有非常显著性统计学意义(x2=7.976,P<0.01)。不同组织分化程度的骨肉瘤显示不同水平的PTEN蛋白表达,高分化骨肉瘤(Ⅰ~Ⅱ级),PTEN蛋白阳性表达率为73.9%(17/23);低分化骨肉瘤(Ⅲ级),PTEN蛋白阳性表达率为25.0%(5/20),两组之间在统计学上有显著性差异(p<0.01)。PTEN表达的强度与骨肉瘤组织学级别呈负相关,有显著统计学意义(rs′=-0.4922,P<0.01)。对各病例组测得的光密度值进行单因素方差分析显示,F=47.9,P<0.01,有非常显著性统计学意义。进一步两两比较,骨软骨瘤与骨肉瘤Ⅰ-Ⅱ级间q=19.68,P<0.05;骨软骨瘤与骨肉瘤Ⅲ级间q=24.02,P<0.05;骨肉瘤Ⅰ-Ⅱ级与骨肉瘤Ⅲ级间q=43.7,P<0.05,均有显著统计学意义。中文摘要 结论:本研究结果支持PTEN作为抑癌基因的候选基因;PTEN蛋白是一种在骨肿瘤中也有表达的肿瘤抑癌基因蛋白,不仅可以用于肺癌、神经胶质细胞瘤等的研究,也可用于骨肿瘤的研究;PTEN的表达与骨肿瘤的良恶性及分化程度有一定的关系,随分化程度的增高其表达增强。