阻断PI3K/Akt通路对云南宣威肺腺癌XWLC-05细胞的放射敏感性研究

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【研究目的】探讨PI3K/Akt特异性抑制剂Ly294002对云南宣威肺腺癌XWLC-05细胞株的放射增敏作用。【研究方法】1.克隆形成实验测定XWLC-05细胞在不同剂量X线照射下的存活分数,分别用单靶多击数学模型拟合细胞存活曲线,并求出放射生物学参数D0、Dq、N、SF2、SER。2.四氮唑兰比色法(MTT法)检测X线4Gy照射24h、48h后不同浓度Ly294002对XWLC-05细胞的抑制率,评价细胞放射敏感性。3.流式细胞术测定不同条件下Ly294002对XWLC-05细胞的周期分布和细胞凋亡情况的影响,评价Ly294002的作用机制。【研究结果】1.克隆形成实验:XWLC-05细胞在对照组各个剂量点的存活分数均高于实验组,对照组D0、Dq、N、SF2的值均大于实验组,SER值为1.05,对照组和实验组存活分数经成组t检验有显著差异(t=2.856,p=0.036)。2.MTT法实验:不同浓度(5、10、20、50μmol/l)Ly294002作用XWLC-05细胞24小时及48小时后,对照组抑制率小于实验组,Ly294002作用24小时后,对照组和实验组抑制率经成组T检验有显著差异(t=-17.489,p=0.003),Ly294002作用48小时后对照组和实验组抑制率经成组T检验无显著差异(t=-2.201,p>0.05)。3.流式细胞检测:Ly294002作用12小时后,未照射实验组G2/M期细胞比例大于对照组,照射实验组G2/M期细胞比例小于对照组,对照组和实验组G2/M期细胞经成组t检验无显著差异。Ly294002作用24小时和36小时后,实验组G2/M期细胞比例均大于对照组,对照组和实验组G2/M期细胞经成组t检验有显著差异(p<0.05)。Ly294002作用12小时、24小时和36小时后,各组凋亡结果不明显,经秩和检验,对照组和实验组细胞凋亡结果无明显差异(p>0.05)。【结论】1.Ly294002对XWLC-05细胞有放射增敏作用。2.不同浓度Ly294002作用XWLC-05细胞24小时后,对细胞的抑制皇浓度依从性,随着Ly294002浓度的增加,抑制率增加;且照射组抑制率大于单纯Ly294002组;提示24小时可能为Ly294002最佳作用时间。3.XWLC-05细胞经照射后出现G2/M期细胞阻滞,经Ly294002作用后G2/M期细胞阻滞增加,凋亡率不明显,提示Ly294002可能通过增加G2/M期细胞数增加XWLC-05细胞的放射敏感性。
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