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鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病,是危害养禽业的主要传染病之一。其血清型众多,且不同血清型之间的交叉反应小甚至不存在交叉反应,而且现有的商品化疫苗对流行毒株无法提供有效的免疫保护作用,使得IB在免疫鸡群仍不断流行传播。因此,在本地区流行毒株当中培育弱毒疫苗,对防治IB的发生和流行有重要的意义。Sczy3为本实验室2009年分离的一株LX4型IBV毒株,将其在非免疫鸡胚连续传至100代(P100)以致弱,希望制备出一株致病力减弱但具有良好免疫原性的IB疫苗株。试验结果显示：毒株在鸡胚传代过程中,病毒滴度逐渐升高,接种鸡胚出现典型病变,毒株能够高度适应鸡胚；与之相反,取不同代次毒进行动物试验,结果显示该毒株对非免疫雏鸡的致病力随着鸡胚传代次数的增加会逐渐降低。P100代毒接种鸡群后,未出现临床发病症状,发病率和死亡率均为0%,说明Sczy3毒株在鸡胚连续传至P100代时已充分致弱。为了观察四川地区近年来IBV的流行特点,本试验在2012-2013年期间对四川部分地区IBV进行了分离鉴定,共分离鉴定出10株IBV野毒株。对毒株S1基因进行克隆测序,并与GenBank上公布的30株参考毒株的相应序列进行比较分析。结果发现：分离株与参考株之间S1核苷酸序列的同源性为71.0%-99.8%；而10株IBV分离株彼此之间的S1基因核苷酸序列的同源性为74.5%-98.7%。建立遗传发育进化树发现：40株毒株可分为6个基因型,10株四川分离株分属于3个基因型,其中7株与近年国内主要流行株LX4属同一基因群,还有2株与台湾地区特有流行株TW2296/95、TW2575/98属同一基因群。大部分毒株与当前常用疫苗株的亲缘关系比较远。这一结果表明：目前在四川IBV的流行仍是以LX4型为主,但TW型IBV也逐渐开始流行起来。为评价Sczy3 P100对同源毒株及近年四川IBV流行毒株的免疫保护效力。取Sczy3 P100代毒接种7日龄非免疫雏鸡,免疫后2周分别用Sczy3 P3和分离株ScT、CK/CH/SCEM/12I进行攻毒,统计各试验组鸡群抗体效价、攻毒后临诊症状和病死率、气管和肾脏的带毒情况等指标,并制备组织病理学切片。结果显示：免疫组鸡只血清样品全部转为阳性,而非免疫对照组检测全为阴性,Sczy3 P100对同源毒株和同一基因型分离株CK/CH/SCEM/12I均可提供有效免疫保护；而对不同基因型毒株ScTW不能提供有效免疫保护,试验鸡可检出较高比例的气管和肾脏带毒。目前我国有众多的IBV基因型流行,故而1BV新疫苗的研究任重道远。