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目的:注射用贞芪扶正是由黄芪、女贞子等中药组成的冻干粉针剂,是由河北医科大学药学院自行研制的一种新型剂型。本实验旨在探讨该药对小鼠免疫功能的调节作用以及对化疗和放疗的增效减毒作用。
方法:1注射用贞芪扶正的抗瘤增效作用;
1.1 注射用贞芪扶正对荷H<,22>瘤小鼠放疗的增效作用:取小鼠100只,雌雄各半,体重18-22g,在无菌条件下,取生长7天的荷H<,22>瘤小鼠腹水,用3倍体积生理盐水稀释,取0.2ml细胞悬液注射于小鼠腋窝皮下,于接种次日,按体重随机分为10组,每组10只。其中5组经<60>Co射线3.5GY/分照射3.5分,然后给药,放射对照组腹腔注射生理盐水,给药组分别腹腔注射注射用贞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,阳性对照组灌胃给贞芪扶正胶囊3g/kg。另5组不经照射,分组及给药方法同上,容积均0.2ml/10g体重,每天1次连续7天。于末次给药次日,剥取瘤组织,称重,取每组瘤重平均值,计算各给药组抑瘤率。
1.2 注射用贞芪扶正对荷H<,22>瘤小鼠化疗的增效作用:取小鼠100只,雌雄各半,体重18-22g,在无菌条件下,取生长7天的荷H<,22>瘤小鼠腹水,用3倍体积生理盐水稀释,取0.2ml细胞悬液注射于小鼠腋窝皮下,于接种次日,按体重随机分为10组,每组10只。其中阴性对照组腹腔注射生理盐水,给药组分别腹腔注射注射用贞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,阳性对照组灌胃给贞芪扶正胶囊3g/kg。环磷酰胺对照组皮下注射环磷酰胺(8mg/kg),合用药物组在皮下注射环磷酰胺(8mg/kg)的同时腹腔注射注射用贞芪扶正1.5g、3g和6g/kg及灌胃贞芪扶正胶囊3g/kg,以上给药容积均为0.2ml/10g体重,每天1次连续7天。于末次给药次日,剥取瘤组织,称重,计算各给药组抑瘤率。
2 注射用贞芪扶正的减毒作用;
2.1 注射用贞芪扶正对放射线照射的减毒作用:取小鼠70只,雌雄各半,体重18-22g,取其中60只小鼠经<60>Co射线7.5GY/分照射1.5分,然后按体重随机分为6组,每组10只,另10只不经<60>Co照射,作为正常对照组。放射对照组和正常对照组腹腔注射生理盐水,给药组分别腹腔注射注射用贞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,贞芪扶正胶囊组按3g/kg灌胃给药,阳性对照组灌胃给地榆升白片0.2g/kg。给药容积均0.2ml/10g体重,每天1次连续7天。于末次给药次日,小鼠眼眶取血,用全自动血细胞计数仪计数白细胞。取血后处死小鼠,剖取脾脏和胸腺,计算脏器指数,比较给药组与对照组各项指标差异的显著性。
2.2 注射用贞芪扶正对化疗的减毒作用:取小鼠70只,雌雄各半,体重18-22g,正常对照组腹腔注射生理盐水,其余6组于第1、3、5天皮下注射环磷酰胺30mg/kg,给药组每天分别腹腔注射注射用贞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,及灌胃贞芪扶正胶囊3g/kg,阳性对照组灌胃给地榆升白片0.2g/kg,环磷酰胺对照组腹腔注射生理盐水。给药容积均0.2ml/10g体重,每天1次连续7天。于末次给药次日,小鼠眼眶取血,用全自动血细胞计数仪计数白细胞。取血后处死小鼠,剖取脾脏和胸腺,计算脏器指数,比较给药组与对照组各项指标差异的显著性。
3 注射用贞芪扶正对小鼠免疫功能的影响;
3.1 注射用贞芪扶正对小鼠体液免疫的影响(血清溶血素法):取小鼠60只,雌雄各半,体重18-22g,按体重随机分为6组:空白对照组(生理盐水,腹腔注射),环磷酰胺阳性对照组(10mg/kg,腹腔注射),贞芪扶正胶囊组(3g/kg,灌胃给药),注射用贞芪扶正高剂量组(6.0g/kg,腹腔注射)、中剂量组(3.0g/kg,腹腔注射)、低剂量组(1.5g/kg,腹腔注射),每组10只。给药容积均为0.2ml/10g体重,一天一次,连续7天。在上述开始给药第3天,各腹腔注射20%绵羊红细胞悬液0.2ml,末次给药后1小时摘眼球取血,分离血清,测定每只鼠的半数溶血值(HC<,50>)。
3.2 注射用贞芪扶正对小鼠细胞免疫的影响(二硝基氟苯法):取小鼠60只,雌雄各半,体重18-22g,按体重随机分为6组,分组方法同3.1。给药容积均为0.2ml/10g体重,一天一次,连续7天。在上述第2天给药后致敏,末次给药后1小时(致敏后第5天),进行攻击,攻击24小时后,脱颈椎处死小鼠,剪下左右耳壳,用打孔器打取直径8mm相同部位耳片称重,同时取小鼠胸腺、脾脏称重。左右耳片重量之差为肿胀度,并计算脾系数和胸腺系数,比较空白对照组和各给药组间差别的显著性。
结论:1、注射用贞芪扶正对Co<60>放疗或环磷酰胺化疗抗H<,22>实体瘤有显著增效作用;2、注射用贞芪扶正对Co<60>放疗或环磷酰胺化疗有显著的减毒作用;3、注射用贞芪扶正能显著增强小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,提示具有免疫调节作用;4、注射用贞芪扶正在提高机体免疫功能,增强抗肿瘤能力方面与贞芪扶正胶囊相比疗效显著。