【摘 要】
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目的:从人胚胎脑海马分离、扩增、克隆神经干细胞(neural stem cells NSCs),探索其体外生长的最佳条件,比较不同时间点NSCs分化为神经元和胶质细胞的比例;通过神经上皮干细胞
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目的:从人胚胎脑海马分离、扩增、克隆神经干细胞(neural stem cells NSCs),探索其体外生长的最佳条件,比较不同时间点NSCs分化为神经元和胶质细胞的比例;通过神经上皮干细胞蛋白(Nestin)表达的变化,分析成年大鼠纹状体海人藻酸(KA)损伤后的病理变化及可能机制;异种移植体外培养的人NSCs(NHSCs),初步探索KA损伤信号对异种移植的HNSCs存活的影响.方法:1、原代细胞培养取材于胎龄8-12周正常药物引产的人胚胎脑海马.2、为研究KA损伤后纹状体Nestin表达的变化及化学损伤信号对异种移植的HNSCs存活的影响,该研究采用体重为220±20g的成年健康SD大鼠.结论:1.从人胚胎脑海马成功分离出NSCs,在不同时间点,HNSCs分化的神经元和胶质细胞比例不同.机械分离法可以获得更多的活细胞,原代培养易形成较多的细胞球NSCs的体外分裂增殖必须依赖于h-EGF和h-bFGF的共同作用,而h-LIF对早期培养的HNSCs的影响不明显.2.正常成年大鼠纹状体Nestin<+>细胞染色较弱,KA损伤后纹状体Nestin<+>细胞染色强度显著增加,且在不同时间点呈现一个时空性的变化,而损伤对侧接近正常水平,提示损伤后免疫组化染色增强的Nestin<+>细胞可能由静息状态的NSCs或神经祖细胞分裂而来,Nestin的变化可能与它们参与损伤后的自身修复有关.3.体外培养的HNSCs移植到正常和KA损伤的大鼠脑,仅在损伤鼠检测到了存活细胞,提示损伤信号对移植细胞的存活可能起到了积极的作用.
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