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目的:观察MCAO大鼠脑梗死后远隔损害部位;探讨芪仙通络方对MCAO大鼠远隔损害部位轴突再生的影响及作用机制,为芪仙通络方治疗脑梗死的临床应用提供科学依据。方法:采用改良线栓法复制MCAO大鼠模型。先选取100只造模成功的大鼠,按随机数字表法分为5组:芪仙通络方高剂量组、芪仙通络方中剂量组、芪仙通络方低剂量组、胞磷胆碱组、模型组,每组20只,再设假手术组20只作对照,总共120只大鼠。在MCAO术后第3、7、14天每组随机抽取8只进行Berdson神经功能评分。第14天评分后取材,先从假手术与模型组中,各随机选取4只进行甘氨酸银浸镀染色,观察轴突变性情况,确定远隔损害部位;再从所有组中各抽选5只进行GAP-43免疫荧光单标,检测远隔损害部位GAP-43蛋白表达水平,观察轴突再生情况;最后每组抽选3只进行Western Blot实验,检测梗死同侧脑组织c AMP、PKA、Nogo-A、Nogo R蛋白相对表达水平。结果:(1)远隔损害发生部位:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分显著升高(P<0.01);大鼠脑组织经甘氨酸银浸镀染色,在5倍镜下时,可见左侧大脑中动脉堵塞后其主要供血区及左侧丘脑、黑质区域,脑组织明显变性坏死,提示造模成功且丘脑和黑质部位发生了远隔损害。而在20倍镜下时,两组颈髓部位无形态学差异,提示脑梗死后颈髓部位未发生远隔损害。(2)神经功能评分:与模型组比较,第3、7、14天时胞磷胆碱组及芪仙通络方高中低各剂量组神经功能评分均显著降低(P<0.05);与胞磷胆碱组比较,第7、14天时芪仙通络方各剂量组神经功能评分改善(P<0.05);第7、14天时芪仙通络方不同剂量组组间比较,中剂量组神经功能恢复最好(P<0.05),提示改善神经功能评分方面,中西药作用明确,芪仙通络方各剂量组优于胞磷胆碱组,且芪仙通络方中剂量改善作用最明显。(3)GAP-43蛋白表达量:与模型组比较,胞磷胆碱组及芪仙通络方高、中、低各剂量组远隔损害部位轴突再生标志物GAP-43蛋白表达均明显上调(P<0.01);与胞磷胆碱组比较,芪仙通络方高、中、低各剂量组GAP-43蛋白表达增加(P<0.05);芪仙通络方不同剂量组组间比较,中剂量组GAP-43蛋白表达增加最显著(P<0.05)。提示中西药物均能促进脑梗死后远隔损害部轴突再生,芪仙通络方各剂量组优于胞磷胆碱组,且芪仙通络方中剂量促进作用最明显。(4)c AMP、PKA、Nogo-A、Nogo R蛋白表达量:与模型组比较,胞磷胆碱组及芪仙通络方高、中、低各剂量组均能明显上调轴突再生促进分子c AMP、PKA蛋白表达水平(P<0.05),下调轴突再生抑制分子Nogo-A、Nogo R蛋白表达(P<0.05);与胞磷胆碱组比较,芪仙通络方高、中、低各剂量组c AMP、PKA蛋白表达增加(P<0.05),Nogo-A、Nogo R蛋白表达减少(P<0.05);芪仙通络方不同剂量组组间比较,中剂量组c AMP、PKA蛋白表达增加最显著(P<0.05),Nogo-A、Nogo R蛋白表达减少最明显(P<0.05)。提示中西药物均能通过上调c AMP、PKA蛋白表达,下调Nogo-A、Nogo R蛋白表达,促进脑梗死后远隔损害部位轴突再生,芪仙通络方各剂量组优于胞磷胆碱组,且芪仙通络方中剂量促进轴突再生作用最明显。结论:(1)MCAO大鼠脑梗死后,梗死同侧的丘脑与黑质轴突变性发生远隔损害,而颈髓部位轴突无改变,不是远隔损害部位。(2)芪仙通络方可促进MCAO大鼠脑梗死后,远隔损害部位丘脑与黑质的轴突再生。(3)芪仙通络方促进MCAO大鼠脑梗死后神经功能恢复的机制之一,可能是通过激活c AMP/PKA信号通路,同时抑制Nogo-A/Nogo R信号通路,共同促进远隔损害部位丘脑与黑质的轴突再生来实现。