环肽是第三种策略的典型代表,其限制性构象能稳定多肽的二级结构,一方面能增加与受体的亲和力和选择性,提高生物活性;另一方面还有可能提高环肽的抗酶解能力<[3]>,在多肽药物的设计中经常被使用到.为了寻找活性高并能改善其体内的代谢稳定性的Tα1类似物,在已有文献报道的构效关系研究的基础上,我们设计了一系列的含半胱氨酸的环肽类似物,引入半胱氨酸的目的在于合成策略的考虑.考虑环肽形成限制构象过于刚性可能影响到生物活性构象的形成,我们在设计的环肽又分别引入了脂肪氧醚链改善环肽的构象刚性,以期对环肽保持原有活性构象有积极意义.在这些化合物中,在此基础上,通过环合过程中引入的巯基作为修饰位点我们对环肽进行PE修饰,如果能进一步提高肽类化合物在体内抗降解能力.将为以后发展抗酶解和化学降解的肽类药物奠定基础.在该课题中,我们应用硫酯法合成了线性肽硫酯25个,从中选择了15个线性肽硫酯进行环合得到了15个新结构的环肽,这些环肽中的5个含有脂肪族链状结构,分别应用两个不同分子量mPEG-MAL对其中的1个环肽进行了修饰研究.所有目标化合物经过RP-HPLC纯化,纯度大于90％,经质谱分析确定结构正确.从淋巴细胞增殖实验的结果来看(1)在高浓度的条件下(100μg/L),30个化合物具有促淋巴细胞增殖的效果,增殖活性均好于阳性对照物Tα<,1>(17—24)和Tα<,1>.(2)在中等浓度的条件下(10μg/L),19个化合物具有促淋巴细胞增殖的效果,其活性均好于阳性对照物Tα<,1>(17—24),16个化合物促淋巴细胞增值的效果强于Tα<,1>.(3)在低浓度下(1μg/L),35个化合物包括阳性对照化合物和Tα<,1>均未观察到显著的促淋巴细胞增殖的效果.从环合前后活性变化的情况来看:环合后得到的环肽产物和未环合前肽硫酯相比较:(1)在中等水平的浓度条件下,15个环肽中有13个显示了淋巴细胞增殖的效果,其中有3个在环合后活性降低,其余10个没有显示出显著性的差异.(2)在高浓度的条件下,15个环肽中有14个显示了淋巴细胞增殖的效果,6个化合物的活性比环合前的活性提高,5个化合物比环合前的线性肽硫酯活性降低.为了进一步研究合成的Tα<,1>活性片段环肽类似物的其它免疫增强效果,我们还将进行环肽类似物的诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ的实验,这部分工作委托中科院上海药物所免疫药理室,实验正在进行当中,尚未得到可分析数据.