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目的探讨人参皂苷Rb1能否通过激活线粒体ATP依赖性钾通道(ATP-sensitive potassium channels,Mito KATP)减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。方法实验细胞采用来源于胚胎期大鼠心脏的H9c2细胞,以安宁包及无糖培养基对H9c2细胞进行缺氧/复氧（Hypoxia-Reoxygenation,HR）处理以模拟心肌缺血再灌注损伤。细胞分为5组:A组为正常对照组,B组为缺氧/复氧处理组（HR）,C组为人参皂苷Rb1预处理组,D组为人参皂苷Rb1与Mito KATP特异性阻滞剂5-羟基癸酸（5-hydroxydecanoate,5-HD）预处理组,E组为Mito KATP特异性激动剂二氮嗪（D iazoxide）预处理组,除正常对照组以外其他各组在经过不同处理后均进行缺氧/复氧处理（缺氧3小时,复氧3小时）。以CCK-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法检测不同浓度人参皂苷Rb1处理H9c2不同时间后对细胞活力的影响;缺氧/复氧处理完成后,检测各组细胞内ATP含量及上清液中乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenas e,LDH）含量;以罗丹明123（Rhodamine 123,Rh123）检测各组细胞的线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential,MMP）强度、以DFCH-DA检测各组细胞ROS的产生量、以Calcein-AM/Co Cl2检测各组细胞线粒体膜通透性转换孔（M itochondrial Membrane Permeability Transition Pore,m PTP）的开放情况,使用Hoechst 33342法及TUNEL/DAPI法检测各组细胞凋亡率,使用梯度离心法提取线粒体并分离胞浆,以Western blot法检测线粒体及胞浆中凋亡相关蛋白的表达。结果一、不同浓度的人参皂苷Rb1对H9c2细胞活性影响以50μM、100μM、150μM、200μM浓度的人参皂苷Rb1处理H9c2细胞6小时、12小时及18小时后均未观察到细胞毒性,且具有一定程度增强H9c2细胞活性的作用,这种作用在100μM时达到顶峰,且在一定时间区间内随处理时间的延长而更加明显,因此本实验选用100μM浓度的人参皂苷Rb1处理18h这一条件进行实验。二、人参皂苷Rb1对缺氧/复氧后H9c2细胞内ATP含量及LDH释放量的影响与正常对照组相比,模型组的ATP含量显著降低（P<0.01）,LDH释放量显著升高（P<0.01）;与模型组相比,人参皂苷Rb1预处理组及Diazoxide预处理组ATP含量显著升高（P<0.01）,LDH释放量显著降低（P<0.01）;与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1加5-HD预处理组ATP含量显著降低（P<0.01）,LDH释放量显著升高（P<0.01）。三、人参皂苷Rb1对缺氧/复氧后H9c2细胞MMP强度及ROS生成量的影响与正常对照组相比,模型组的MMP强度显著降低（P<0.01）,ROS生成量显著升高（P<0.01）;与模型组相比,人参皂苷Rb1预处理组及Diazoxide预处理组MMP强度显著升高（P<0.01）,ROS生成量显著降低（P<0.01）;与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1加5-HD预处理组MMP强度显著降低（P<0.05）,ROS生成量显著升高（P<0.01）。四、人参皂苷Rb1对缺氧/复氧后H9c2细胞m PTP开放程度的影响与正常对照组相比,模型组的m PTP开放程度显著升高（P<0.01）;与模型组相比,人参皂苷Rb1预处理组及Diazoxide预处理组m PTP开放程度显著降低（P<0.01）;与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1加5-HD预处理组m PTP开放程度显著升高（P<0.01）。五、人参皂苷Rb1对缺氧/复氧后H9c2细胞凋亡率及凋亡相关蛋白的影响与正常对照组相比,模型组的细胞凋亡率显著升高（P<0.01）;与模型组相比,人参皂苷Rb1预处理组及Diazoxide预处理组细胞凋亡率显著降低（P<0.01）;与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1加5-HD预处理组细胞凋亡率显著升高（P<0.01）。与正常对照组相比,模型组线粒体内细胞色素C含量显著降低（P<0.05）,胞浆内细胞色素C及cleaved caspase-3含量显著增多（P<0.05）;与模型组相比,人参皂苷Rb1预处理组及Diazoxide预处理组线粒体内细胞色素C含量显著增多（P<0.05）,胞浆内细胞色素C及cleaved caspase-3含量显著降低（P<0.01）;与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1加5-HD预处理组细胞线粒体内细胞色素C含量显著降低（P<0.05）,胞浆内细胞色素C及cleaved caspase-3含量显著增多（P<0.01）。结论人参皂苷Rb1在H9c2细胞缺氧/复氧过程中,能通过激活线粒体ATP敏感性钾通道维持线粒体膜电位,增高ATP的含量并降低ROS的产生,进而使线粒体膜通透性转换孔开放减少,产生线粒体保护作用,使线粒体内细胞色素C向胞浆的释放减少,从而减轻缺氧/复氧所诱导的细胞凋亡。