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首次采用高效逆流色谱技术,以正己烷/乙酸乙酯/正丁醇/乙醇/水(0.5:2:1:0.5:3.5,v/v/v/v/v)为溶剂体系,从葛根乙酸乙酯提取物中成功分离得到葛根素、大豆苷、大豆苷元,3′-羟基葛根素和3′-甲氧基葛根素五种黄酮化合物,经高效液相色谱检测,其纯度均大于90%。通过电喷雾质谱和核磁共振波谱技术鉴定了五种单体化合物的化学结构。实验选取与抗炎免疫密切相关的基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase2,MMP-2)、磷酸二酯酶-4(Phosphodiesterase-4,PDE-4)和5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)为靶点,利用体外活性抑制实验和超滤液质联用技术筛选并鉴定防风、葛根、红花、土茯苓和红土茯苓中潜在的抗炎免疫活性成分。在MMP-2的体外活性和超滤液质联用筛选实验中,发现防风和葛根对其均有抑制作用,且防风具有较强的抑制活性。5-氧甲基维斯阿米醇苷具有较强抑制MMP-2活性作用,其次为葛根素、大豆苷、大豆苷元、升麻素苷、升麻素和亥茅酚苷;在PDE-4的体外活性和超滤液质联用筛选实验中,红花表现出强抑制活性,其次为葛根、防风、土茯苓。在单体活性筛选中,5-氧甲基维斯阿米醇苷表现出强抑制活性,其次为升麻素苷、落新妇苷、升麻素、红花黄色素B、葛根素、羟基红花黄色素A、大豆苷、亥茅酚苷、大豆苷元、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷、3′-羟基葛根素。但是白藜芦醇和3′-甲氧基葛根素没有抑制PDE-4活性;在5-LOX的筛选实验中,防风表现出强抑制活性,其次为土茯苓、红土茯苓、红花和葛根。红花黄色素B对5-LOX有强抑制活性,其次为羟基红花黄色素A、大豆苷、白藜芦醇、大豆苷元、3′-羟基葛根素、亥茅酚苷、落新妇苷、升麻素苷、5-氧甲基维斯阿米醇苷、黄杞苷、葛根素、异落新妇苷、升麻素和异黄杞苷,而3′-甲氧基葛根素没有抑制作用。