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牛乳铁蛋白素（lactoferricin B，LfcinB）是一种抗菌活性非常高的微生物活性肽，且来源广泛。在发挥抗肿瘤活性的浓度范围内，LfcinB对人体正常的细胞没有影响，但是它对人类许多肿瘤细胞系具有细胞毒作用，呈现出一定的针对性。本课题将人工合成的LfcinB作用于人急性T细胞白血病的T淋巴细胞（Jurkat cell），应用流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）、蛋白质免疫印迹分析法（Western Blotting）研究LfcinB对Jurkat细胞增殖、分化和凋亡的影响，将细胞增殖、分化和凋亡的机制系统地结合起来进行分析和讨论。本课题的主要研究内容包括四部分：（1）CCK-8法检测LfcinB对Jurkat细胞增值的影响。实验以浓度为100nmol/mL的雷帕霉素作为对照组，以作用浓度分别为0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的LfcinB作为实验组，分别测定Jurkat细胞的增值抑制率。结果显示：LfcinB对Jurkat细胞增殖的影响效果随着其作用浓度和时间的增加而增大，即呈现明显的浓度时间依赖性；（2）利用荧光倒置显微镜检测浓度分别为0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的LfcinB作用Jurkat细胞24h后的形态学变化。结果显示：实验组细胞的细胞核发生浓缩，呈浓密染色状态，而空白组细胞的细胞核则呈均匀染色状态，此结果表明实验组的细胞发生凋亡；（3）AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞术分析不同浓度的LfcinB作用Jurkat细胞不同时间后，细胞发生早期凋亡的变化规律。实验以浓度为100nmol/mL的雷帕霉素作为对照组，以作用浓度分别为0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的LfcinB作为实验组，分别测定Jurkat细胞的早期凋亡率。结果显示：在相同的LfcinB作用时间内，Jurkat细胞的早期凋亡率随着LfcinB作用浓度的增大而增加；对于同一作用浓度的LfcinB，当作用时间到达72h时，其早期凋亡率有明显的下降趋势，而晚期凋亡或是坏死细胞的比例有所增加；（4）Western blot法检测并分析不同浓度的LfcinB作用Jurkat细胞不同时间后，Jurkat细胞内P21waf1、AKT、mTOR的磷酸化程度变化和Nocth1、C-MYC、Bcl-2、Bax、Cyclin D1的蛋白表达程度的变化，实验分为8组，分别为雷帕霉素组(100nmol/mL)、0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、雷帕霉素+PI3K抑制剂和LfcinB+PI3K抑制剂；结果显示：Jurkat细胞内的P21waf1、AKT、mTOR的磷酸化程度随着LfcinB浓度的升高和作用时间的延长而降低；Nocth1、C-MYC、Bcl-2、Cyclin D1的蛋白表达程度与LfcinB的作用时间和浓度呈负相关，而Bax的蛋白表达程度与LfcinB的浓度以及作用时间呈正相关。