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目的:1.通过摩腹法作用于IBS-C大鼠,观察大鼠的肠道活动效应。2.探究摩腹法对EGCs、GDNF、AKt的影响。方法:1.采用冰水灌胃法建立IBS-C大鼠模型,将摩腹组、模型组、空白组大鼠分笼独立饲养,普通饲料喂养,自由进水。每日上午8:30用低于4℃的生理盐水进行冰水灌胃(3ml/只),连续灌胃14d,正常组给予等量常温生理盐水灌胃。待造模成功后,给予摩腹组大鼠腹部摩腹28天,14min/d;模型组大鼠每日仅固定14分钟,不予任何治疗,共28天;空白组大鼠正常饲养,不与任何治疗干预,共持续28天。每日收集并计算大鼠粪便湿重、干重和粪便颗粒数,后进行大鼠粪便性状评分以及大鼠粪便含水量测定。在造模期结束后24小时内和实验期结束后24小时内,对三组大鼠进行肠道敏感性测定,采用腹部撤离反射评分法(AWR)观察记录大鼠腹部抬起及背部拱起的容量阈值,每只大鼠测量3次,数据取其平均值。2.在实验一指标测定结束后,用2%的戊巴比妥钠溶液对大鼠腹腔进行注射麻醉,然后在双侧颈总动脉处放血处死,摘取结肠组织,PBS液(PH=7.4)浸没。于4℃条件下,取部分结肠组织,4%多聚甲醛固定,然后对各组结肠组织样本行×15000和×30000透射电镜观察。采用Image-Pro6.0 Plus软件,对EGCs超微结构测量,计算异染色质面积大小以及EGC细胞线粒体。采用Western blotting法检测IBS-C大鼠结肠GDNF蛋白表达变化和各组IBS-C大鼠结肠P-Akt蛋白表达变化。结果:1.造模结束后,摩腹组和模型组大鼠粪便性状评分明显低于空白组,与空白组相比具有统计学差异(~△P<0.05)。模型组和摩腹组大鼠粪便颗粒数跟空白组相比具有明显统计学意义(P<0.05)。摩腹组和模型组大鼠粪便含水率显著降低,与空白组存在明显差异性。摩腹组和模型组相比,在行直肠球囊扩张时,引起大鼠AWR的最小容量阈值降低,且差异显著(~△P<0.01)。2.实验期摩腹后,摩腹组大鼠粪便性状评分已接近空白组,与模型组相比具有明显差异(~△P<0.05)。摩腹组大鼠粪便颗粒数跟模型组大鼠相比,具有统计学差异(P<0.05)。摩腹组大鼠粪便含水率已接近空白组,跟模型组大鼠相比具有明显差异性。摩腹组大鼠直肠球囊扩张引起的大鼠AWR的最小容量阈值升高,接近空白组,跟模型组相比具有明显差异(~△P<0.01)。3.通过透射电镜发现,与空白组比较,模型组异染色质面积减小,线粒体数目增加;与模型组像相比,摩腹组异染色质面积增加,线粒体数目显著减少。4.运用Western blotting法检测,结果发现与空白组相比,GDNF蛋白表达被下调,当予以摩腹干预后,GDNF蛋白表达显著上调。进一步对PI3K/AKt信号通路分析发现,与空白组比较,模型组磷酸化AKt被显著下调,给予摩腹干预后,磷酸化AKt被显著上调。结论:1.摩腹组和模型组大鼠粪质干硬、粪便颗粒数减少,内脏敏感性增高,跟正常组相比具有统计学差异,证明冰水灌胃法造模成功。2.实验期经摩腹干预后,摩腹组大鼠肠活动效应指标明显改善,证明摩腹法对IBS-C具有一定的疗效。3.摩腹法能够调整EGCs超微结构,从而改善IBS-C症状。4.摩腹法不仅能通过上调GDNF蛋白表达对ENS产生影响,还可以上调Akt的表达而改变其信号通路,进而对IBS-C产生影响。