【摘 要】
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研究目的用99mTc标记抗CHRNA7单克隆抗体（CHRNA7 m Ab）以制备放射性标记探针,对靶点α7-n ACh Rs进行体内示踪,为胆管细胞癌临床SPECT显像奠定基础。研究方法1.采用细胞免疫荧光检测Hu CCT-1细胞及Hep G2细胞α7-n ACh Rs表达水平;2.SHNH连接CHRNA7 m Ab,并进行99mTc标记以制备99mTc-SHNH-CHRNA7m Ab,鉴定标记探
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研究目的用99mTc标记抗CHRNA7单克隆抗体（CHRNA7 m Ab）以制备放射性标记探针,对靶点α7-n ACh Rs进行体内示踪,为胆管细胞癌临床SPECT显像奠定基础。研究方法1.采用细胞免疫荧光检测Hu CCT-1细胞及Hep G2细胞α7-n ACh Rs表达水平;2.SHNH连接CHRNA7 m Ab,并进行99mTc标记以制备99mTc-SHNH-CHRNA7m Ab,鉴定标记探针的特性;3.进行细胞摄取实验及阻断实验检测放射性标记探针对靶点的亲和性与特异性;4.建立胆管细胞癌荷瘤裸鼠模型,进行SPECT显像及体内分布研究;研究结果1.细胞免疫荧光检测细胞α7-n ACh Rs表达水平细胞免疫荧光结果显示,Hu CCT-1细胞染色后呈强阳性,α7-n ACh Rs表达水平高;Hep G2细胞染色后呈阴性,α7-n ACh Rs表达低下。2.抗体的标记与放射性化学测定99mTc-SHNH-CHRNA7 m Ab的放射性化学纯度＞95%;37℃水浴加热条件,99mTc-SHNH-CHRNA7 m Ab在小鼠新鲜血清中孵育24h后,放射性化学纯度为76.05±2.30%,说明24h内标记探针在小鼠血清中有较好的稳定性。3.细胞摄取实验及阻断实验细胞摄取实验中,Hu CCT-1细胞对99mTc-SHNH-CHRNA7 m Ab的摄取率随时间逐渐增高,且Hu CCT-1实验组摄取率明显高于Hep G2实验组,4h摄取率分别为（16.31±2.36%vs.5.60±0.71%;P＜0.05）。而4h时Hu CCT-1阻断组细胞摄取率降至7.36±1.67%（P＜0.05）。4.SPECT显像与体内分布实验注射99mTc-SHNH-CHRNA7 m Ab后,SPECT扫描结果显示,Hu CCT-1实验组肿瘤组织在6h开始出现放射性聚集,并随时间逐渐浓聚,至24h可见放射性摄取达到最高峰。而Hu CCT-1阻断组肿瘤组织在24h时放射性摄取明显减少,与肌肉摄取接近。体内分布研究亦显示,Hu CCT-1实验组肿瘤组织摄取显著高于阻断组,24h肿瘤组织摄取分别为（13.04±1.30%ID/g vs.1.80±0.75%ID/g;P＜0.05）,肿瘤/肌肉（T/NT）分别为（8.51±3.04 vs.2.63±1.72;P＜0.05）。结论99mTc-SHNH-CHRNA7 m Ab具有较高的放射性化学纯度。标记探针对肿瘤α7-n ACh Rs有较高亲和性和特异性,用于胆管细胞癌荷瘤裸鼠的SPECT显像能取得理想的肿瘤显影,该探针在肿瘤特异性靶点的示踪及定位诊断中具有良好的应用前景。
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