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【背景】 卵巢癌的死亡率居妇科恶性肿瘤首位，70％的患者就诊时已属晚期，且多因转移而死亡，因此探讨肿瘤浸润转移分子作用机制和基因治疗成为目前卵巢癌研究的热点。CD147属免疫超家族成员，不仅参与机体的致炎作用，而且在多种肿瘤组织中高度表达，促进肿瘤的浸润转移和血管形成。我们实验室前期研究结果显示CD147与卵巢肿瘤的浸润转移密切相关，有效地封闭CD147在卵巢癌细胞中的表达可抑制卵巢癌细胞的侵袭能力和穿膜能力，提示CD147可能是卵巢癌的一个药靶分子。 【目的】 初步研究缺氧对卵巢癌中CD147表达的调节作用，并为其下一步的基因治疗建立一个原位移植高转移动物模型。 【方法】 1．采用Matinspectot software和Framework software进行人源性CD147mRNA全长序列的分子生物学功能结构分析。2．采用激光共聚焦技术和半定量RT-PCR方法研究缺氧对卵巢癌细胞中CD147表达调节作用的影响。3．对缺氧细胞再氧合，观察缺氧所致CD147表达上调稳定性。4．应用显微外科技术将人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤植入裸鼠卵巢包膜内，构建人卵巢癌原位移植高转移裸鼠模型。5．对移植瘤和转移瘤组织进行HE染色和透射电镜观察，评价其生长转移的特性。6．对接种细胞和移植瘤组织进行染色体分析以鉴定肿瘤遗传稳定性。 【结果】 1．CD147分子生物学功能结构分析结果显示，CD147mRNA 第四军医大学硕士学位论文全长序列中有103个高度保守序列，其中在CD147的3’末端有两个与缺氧反应元件活性相关的HIFF/HIF转录结合位点，其高度保守的核心序列5’一ATCG一3’与缺氧反应元件的典型核甘酸序列结构相似。2.CD147蛋白定位于细胞浆中。3一AO和HO一8910PM两组细胞，急性缺氧30分钟后CD147表达量较未处理组明显增加，再氧合4小时，8小时，CD 147表达量逐渐回降，且在统计学上具有显著差异(P=0.000)。LSD一均数多重比较结果:8910PM组:未处理组和再氧合4h比较无明显差异(P二0.557)，余各组相比均有显著统计学差异(p<0.05)。3一AO组:各组之间均有显著统计学差异(P(0.05)。3.CoC12缺氧组结果显示:CD147mRNA表达量随缺氧时间的延长逐渐增加，且呈时间依赖性(r=0.998，P二0.038)。缺氧24h时 CD147mRNA仍然呈高表达。4.缺氧再氧合后卵巢癌细胞中CD147mRNA的表达回降，且呈时间依赖性(r=0.904，p=0.035)，再氧合sh时CD147表达量几乎为零。5.裸鼠卵巢部位成瘤率100%，原位移植瘤转移率75%。原位移植荷瘤鼠自然生存时间为14一30天，平均为(20.7士4.89)天。仅肝脏可见转移灶，其它脏器及淋巴结均未见转移。无腹水形成，腹腔冲洗液未见瘤细胞。裸鼠最早成瘤时间为移植后一周，最早转移时间是肿瘤移植后两周。在裸鼠连续传代过程中，移植瘤仍保持原癌组织的病理形态特点及人类卵巢肿瘤的染色体特点。【结论】1.CD147是HIF一IQ的靶基因。2.缺氧可以上调卵巢癌细胞中CD147的表达，它可能是通过增加HIF一IQ的稳定性和转录活性来实现。3.缺氧对卵巢癌细胞中CD147的表达上调作用是可逆的，瞬时性的。4.缺氧和再氧合可作为调控卵巢癌细胞系中CD147表达的一种手段。5.成功建立了人卵巢癌原位移植自发转移模型，填补了国内卵巢癌特异性单向转移模型的空白，为下一步CD147基因治疗动物实验提供了一个更科学、更可靠的技术平艺为口0