道地中药材宁前胡种子萌发及组织培养再生体系研究

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宁前胡,学名白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn)为伞形科(Umbelliferae)前胡属(Peucedanum)多年生草本植物。其基原植物干燥根是一味我国常用中药材,具有疏风散热、降气化痰等功效,多用于风热咳嗽、痰多气喘的气管及支气管炎症疾病的治疗。宁前胡的主要繁殖方法靠种子萌发出苗,而种子萌发在植株生长发育过程中具有重要意义,萌发质量直接影响到植株生长发育情况和对环境的适应能力。近年来,野生前胡因盲目采挖致使野生资源日益减少,造成野生前胡自然资源濒临灭绝地步。另外一方面,宁前胡仿野生抚育栽培品种面临种质退化,农药残留和种子带病等一系列问题。加之,人工栽培前胡药用活性成分种类和数量往往因产地及其气候等生态条件不同而有差异,这给商品药材品质控制和质量管理带来诸多困难。本研究以宁前胡种子、叶片、茎段和块根为实验材料,对种子萌发特性和组织培养再生体系两方面进行了研究,主要研究结果如下:1.研究了外源激素ABA及其抑制剂FL和NDGA,GA3、GA4+7及其抑制剂PA单独作用和互作对宁前胡种子萌发的影响,发现ABA是宁前胡种休眠的主要原因,而GAS对种子萌发是必须存在的。施用ABA抑制剂FL和NDGA可显著改善宁前胡种子发芽率,使出苗整齐,对实际生产具有重要指导作用。2.研究了外源激素ABA和GA3对宁前胡种子萌发幼苗生理生化指标的影响,结果表明ABA浸种可提高幼苗的一些抗逆性指标,但是幼苗弱化情况严重,不利于有机物积累;GA3浸种萌发的幼苗健壮,有机物积累和株高明显增加,这对宁前胡品质和产量提升有重要意义。3.通过对宁前胡外植体无菌体系建立结果来看,叶片、茎段、块根这3种外植体中叶片是最佳外植体选择,其次依次是茎段和块根。4.NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.05 mg/L最适叶片愈伤组织诱导,最高诱导率为95.56%,黑暗或者低光照度有利于叶片愈伤组织的形成,岀愈最早时间为8 d,叶片远轴面(叶背面)接触培养基更有利于叶片愈伤组织的形成;NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L最适茎段愈伤组织的诱导,最高诱导率达80.00%,茎段横放有利于形成愈伤组织,竖放(形态学下端插入培养基)则有利于形态学上端直接分化出不定芽,在形态学下端与培养基接触处形成愈伤组织,但不分化;块根最佳诱导培养基为NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L或者2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,最高诱导率达78.89%。5.MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L对宁前胡愈伤组织增殖和分化效果最好,其中分化率高达66.67%,增殖系数为4.63,愈伤生长状态较好,体积较大。6.宁前胡组培苗最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L,最高生根率达41.1%,平均生根条数为7.2条,根生长粗壮,长8~11 cm;蛭石:腐殖土=1:1的混合基质是宁前胡组培苗最佳栽培基质,移栽成活率高达95.3%。
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