大鼠多发性脑梗塞对脑组织ICAM-1蛋白表达和NOS神经元的影响及相互关系的实验研究

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研究目的:检测大鼠多发性脑梗塞后脑组织毛细血管内皮细胞ICAM-1的表达和NOS阳性神经元表达的各自变化时程,以及两者的相互关系。研究方法:采用颈外动脉逆行插管,颈内动脉注入0.5ml同种血凝块栓子混悬液将48只健康雄性SD大鼠制作成多发性脑梗塞模型,梗塞后1小时到14天处死并取脑,用免疫组织化学法和NADPH-d组织化学法分别和双重标记脑组织切片ICAM-1蛋白和NOS阳性神经元,各6只雄性大鼠作为假手术组和正常组。另外,健康雄性SD大鼠9只同样制作多发性脑梗塞模型,假手术组9只,正常组9只,分别于术后第9天进行跳台实验,连续2天;第11天进行水迷宫实验,连续3天。结果:多发性脑梗塞后1小时脑组织即可见散在的毛细血管内皮细胞表达ICAM-1阳性反应,2小时达到高峰,4小时明显下降,持续3天,第7天时ICAM-1阳性毛细血管明显减少接近正常组。多发性脑梗塞后1、2、4和12小时脑组织NOS阳性神经元数量增加,与正常组相比变化不大,但细胞形态可见胞体和突起着色加深,突起增长、增粗,这4组间无显著性差异(P>0.05)。24小时和3天阳性细胞下降,与上述4组存在显著性差异(P<0.05)。到7天和14天时阳性细胞数与假手术和空白组相近。ICAM-1阳性毛细血管数达到峰值时,NOS阳性神经元也同样达到高峰。只是NOS表达的峰谷相对平缓,到第7天时两者也同样地下降至接近正常范围。跳台实验表明模型组比正常和假手术组的潜伏期明显长,3min内跳下遭电击的错误次数也多。水迷宫实验中,模型组大鼠游完全程的时间以及进入盲端错误次数均比正常和假手术组的增加。和模型组相比,正常和假手术组随时间延长游完全程的时间以及错误次数逐渐减少,学习、记忆和空间辨别能力较强。结论:缺血/再灌注可以激活内皮细胞表达ICAM-1,并和NOS共同参与缺血脑组织的损伤,大鼠多发性脑梗塞后学习、记忆和空间辨别能力下降。
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