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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种重要的食源性条件致病菌,严重时可导致致命感染。随着抗生素大量不合理使用,多重耐药金黄色葡萄球菌不断出现,对食品安全及人畜健康造成严重威胁。本研究以分离自养殖场以及临床上的多重耐药S.aureus为研究对象,研究S.aureus的抗生素耐药种类和耐药程度;利用PCR法研究S.aureus中β-内酰胺类、四环素类、林可酰胺、大环内酯类和氨基糖苷类抗生素的耐药基因以及多药外排泵基因norA的分布情况;并通过体外生长活力测定实验了解舍曲林及其联合抗生素使用对S.aureus体外抑菌及杀菌情况;分别采用结晶紫染色法和甲醇提取法研究舍曲林对S.aureus生物被膜和葡萄球菌黄素形成能力的影响;最后通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)研究舍曲林对S.aureus相关耐药基因和毒力基因转录水平的影响。利用统计学方法对实验结果进行相关性分析,结果如下:(1)分离自养殖场的5株S.aureus菌株至少对7种抗生素耐药,包括β-内酰胺类、四环素类、林可酰胺类、大环内酯类和氨基糖苷类抗生素。且最低抑菌浓度(MIC)均远超出CLSI药敏标准,其中克林霉素和克拉霉素的MIC值高达1024μg/mL,表明从养殖场中分离的S.aureus菌株耐药程度很高。S.aureus对舍曲林的MIC值均为16μg/mL,菌株间没有表现出差异性。大环内酯类耐药基因ermB、四环素类耐药基因tetK和tetL、氨基糖苷类耐药基因aac(6’)/aph(2’’)和aadE以及多药外排泵基因norA在养殖场分离菌株中均有检出,β-内酰胺类耐药基因mecA在临床分离耐甲氧西林菌株USA300中检出。(2)舍曲林与克林霉素、环丙沙星以及四环素具有联合抑菌效果,测定联合用药指数都在1.000以下。其中一株舍曲林与四环素联合用药指数为0.375,表明具有协同抑菌效果。生长曲线显示,舍曲林在低浓度(1μg/mL)下对S.aureus的生长活性影响很小;在1/2 MIC浓度舍曲林和1/2 MIC浓度四环素联合时对于S.aureus具有杀菌效果。在低浓度舍曲林作用下,均能下调多药外排泵基因norA和β-内酰胺类耐药基因mecA的转录水平。(3)在舍曲林作用下,4株菌株的生物被膜形成能力均有不同程度的降低,2株降低较为显著,结晶紫染色法测定OD值降低了35%以上,舍曲林浓度为1/2 MIC值时,Newman降为无生物被膜状态,抑制效果显著。随着舍曲林浓度的增加,产黄素菌株Newman中黄素的含量呈现依赖性降低,舍曲林浓度为1/2 MIC值时黄素含量降低了70%以上,与不产黄素菌株保持在同一水平。舍曲林对于毒力基因的转录水平也有显著性影响,USA300和Newman在舍曲林浓度为0.2μg/mL时,七种毒力基因(hla、hlb、coa、sbi、spa、lukF、brnQ)的表达量差异极显著就出现了极显著降低(p<0.001)。