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目的:研究抗CADM-140kd抗体是否存在于临床无肌病性皮肌炎患者中,如果存在,则对相应的抗原进行纯化和蛋白质鉴定,并对该抗体的临床意义进行初步分析。
方法:以K562细胞提取液作为抗原,应用免疫印迹法检测67例结缔组织病患者和5例正常人的血清。再应用免疫沉淀法和亲和层析法对相应的抗原进行纯化,同时采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱(LC-ESI-IT-MS/MS)技术对抗原蛋白质进行鉴定。最后对抗体阳性和阴性患者的临床资料进行比较,探讨该抗体的临床意义。
结果:在67例结缔组织病患者和5例正常人中,有4例患者抗CADM-140kd抗体阳性,均为临床无肌病性皮肌炎患者,其中1例患者经系统应用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗1月后重新检测该抗体,结果仍呈阳性。抗体阳性组和阴性组皮肌炎患者间质性肺病的发生率虽然没有显著差异(P>0.05),但前者要高于后者(分别为75.0%和50.0%)。用免疫沉淀法纯化后的抗原进行免疫印迹检测并没有明显减少非特异性条带的出现。将亲和层析法纯化的抗原进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,未见到140kd条带。抗原蛋白质经质谱鉴定后没有找到相匹配的蛋白,但是从色谱图和二级质谱图来看,检测到了样品信号,并且能频繁抓取到肽段的二级质谱图。
结论:抗CADM-140kd抗体可能是C-ADM的标记抗体,具有较好的敏感性和较高的特异性,其与间质性肺病之间的相关性尚需要通过进一步的研究来确定。免疫沉淀法和亲和层析法纯化细胞抗原具有一定的局限性。需要通过其他方法降低样品的复杂程度来获得可信的质谱鉴定结果。