淫羊藿总黄酮对去势雄兔干眼症泪腺的保护作用

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目的:在成功构建雄兔干眼症模型的基础上,观察淫羊藿总黄酮对去势雄兔干眼症泪腺的保护作用及凋亡相关基因蛋白表达的影响,探讨淫羊藿总黄酮抗雄激素水平下降所致干眼症的机制,扩增中医药治疗干眼症的临床应用。  方法:(1)以去势的方法构建雄兔干眼症模型,采用正交设计,随机对照的方法进行试验研究。取健康2月龄,体重2.0-2.5kg雄性日本大耳兔60只(贵阳医学院动物中心提供),随机分为A1、B1、C1、D1、E1、A2、B2、C2、D2、E2、A3、B3、C3、D3、E3共15组,每组5只。A代表正常组;B代表假手术组;C代表模型对照组;D代表雄激素(丙酸睾酮)治疗组;E淫羊藿总黄酮治疗组。1代表饲养一个月;2代表饲养两个月;3代表饲养三个月。(2)分别于造模前、末次给药后行Schirmer试验(SIT);耳缘静脉采血,测血清黄体生成素(LH)。取材后进行HE染色,在光镜及透射电镜下观察泪腺细胞形态学变化;运用免疫组织化学方法测定泪腺组织中免疫、炎症反应因子及相关基因蛋白的表达;用原位杂交方法测定泪腺组织中雄激素受体(AR)密度。  结果:(1)各组SIT测量:C组滤纸湿长缩短,与去势前差异有显著性(P<0.05),随时间的延长差异无显著性(P>0.05)。D组滤纸湿长与B组比较增长明显,差异有显著性(P<0.05)。E组滤纸湿长与B组比较增长明显,差异有显著性(P<0.05)。(2)LH检测结果:A1、B1、C1、D1、E1各组间LH含量有显著性差异,随时间延长各组LH含量没有显著性差异。(3)HE染色及透射电镜结果显示:A、B组泪腺细胞形态结构无明显改变;C组泪腺细胞结构有明显改变,且随时间增长逐渐加重;D、E两组间泪腺细胞结构改变较 C组明显减轻。(4)免疫组织化学方法结果显示:A、B、D、E组泪腺导管及泪腺上皮细胞中Bax、TNF-α表达明显低于C组;而TGF-β1、Bcl-2表达明显高于C组。(5)原位杂交方法结果显示:A、B、D、E组雄激素受体密度均高于 C组。  结论:初步证实淫羊藿总黄酮能减轻去势雄兔逐渐加重的泪腺分泌功能损害并减轻其局部炎症反应,可调节体内性激素水平,从而调节和抑制泪腺细胞凋亡,对去势雄兔干眼症有一定的保护作用。淫羊藿总黄酮可能成为治疗因雄激素缺乏而引起的干眼症的新途径。
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