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目的：通过分别使用哥伦比亚血琼脂平板培养过夜加全自动微生物鉴定仪、B群链球菌选择性培养鉴定仪、荧光PCR和哥伦比亚血琼脂平板培养过夜加基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪这几种细菌鉴定手段来对临床采集的样本进行检测，得出这几种方法检测B群链球菌的阳性率和特异性。从而为临床选择合适的B群链球菌的检测方法提供依据。 方法：采集2015年1月至2015年10月来深圳市第四人民医院就诊的育龄妇女的阴道和直肠拭子。具体的采集方法遵照美国2010年版的围产期B族链球菌感染预防指南。其中含有哥伦比亚血琼脂平板过夜培养的两种方法只采集阴道拭子进行检测，另外两种方法需要阴道和直肠拭子各一支进行检测。除荧光PCR检测外，另外三种方法如得出阳性结果，则均需挑取目的菌提取核酸进行16s rDNA测序以验证。统计出各个方法的阳性数、阳性率等数据，再用SPSS19.0软件进行统计学分析计算。 结果：1.使用哥伦比亚血琼脂平板培养加全自动微生物鉴定仪鉴定，对临床上采集到的376例标本进行检测，得到18例阳性结果。阳性率为4.79％2.用血平板共培养376例标本，筛出20例疑似，挑取单个菌落上基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪检测，得出其中17例为无乳链球菌，即B群链球菌，1例因出峰过少无法鉴定，2例粪肠球菌。使用全自动微生物鉴定仪对疑似的菌落进行鉴定，得出的结果为18例为B群链球菌，两例为粪肠球菌。3.用荧光PCR一共检测了166人份的阴道直肠拭子标本。其中阴道拭子共检出14例阳性，直肠拭子共检出28例阳性，有阳性结果的人数为31例。故此方法总的阳性率为18.67%。4.用B族链球菌选择性培养分析系统进行检测，共检测了626例患者样本，阴道拭子标本得到40例阳性，而直肠拭子标本得到25例阳性。其中有7例样本阴道和直肠拭子同时为阳性。即626例患者的阳性数为58例，阳性率为9.26%。5.使用16S rDNA测序，发现选择性培养鉴定仪有4例假阳性，假阳性率为6.15%。 结论：MALDI-TOF与全自动微生物鉴定仪有着相似的可靠性；选择性培养基可以提高B群链球菌的检出率，但是光靠显色来判断是否为阳性容易出现假阳性，可以选择其它方法来进行综合判断；荧光PCR具有相对较高的灵敏度，而且相对能很快的得出结果。