论文部分内容阅读
目的：观察DCLK1和Ki67在正常肠粘膜组织、癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织中的表达；分析DCLK1和Ki67在结直肠癌组织中的表达与临床病理学参数及的意义；着重研究DCLK1+/Ki67-细胞在实体瘤和人结肠癌细胞株LoVo中的分布、形态特征、数量等,探讨其在腺癌组织中与临床病理学参数、患者预后的关系,进而确定结直肠癌干细胞的特异性免疫表型及生物学特征,为抗肿瘤治疗提供新靶点。方法：选取150例结直肠癌组织、34例腺瘤组织、10例正常肠粘膜和10例癌旁组织手工制作组织芯片；HE染色观察不同病理类型组织和LoVo细胞中细胞的形态特征、排列方式、分布位置等：免疫组织化学染色显示DCLK1和Ki67在正常肠粘膜组织、癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织中的表达情况；免疫组化双重标记腺癌组织中DCLK1和Ki67的表达并与相邻切片HE染色的细胞形态进行比较；利用免疫组织荧光染色和化学染色双重标记DCLK1+/Ki67-细胞在人结肠癌细胞株LoVo中的分布、形态特征、数量；利用统计学软件SPSS19.0分析DCLK1、Ki67及DCLK1+/Ki67细胞在结直肠癌组织的表达与临床病理学参数及预后的意义。结果：1 HE染色观察正常肠粘膜组织腺上皮排列规则,呈腺管状,其间可见到杯状细胞,腺细胞呈柱状,胞浆丰富,胞核位于基底部,无异型性和病理性核分裂象；腺瘤组织中,可见到腺上皮增生呈假复层,在伴有不典型增生的组织中细胞核呈长杆状,部分细胞具有异型性；在腺癌组织中观察到细胞排列紊乱,呈不规则腺管状或弥漫分布,细胞核大深染,异型性明显,可见到病理性核分裂象。2 Ki67和DCLK1在正常肠黏膜组织、癌旁组织、腺瘤组织与癌组织中表达存在差异(P<0.05)；在正常肠黏膜组织、癌旁组织与腺瘤组织中表达差异不明显(P>0.05)。3在结直肠癌组织中DCLK1的表达与部位、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),而与组织学类型、性别、年龄无统计学意义(P>0.05)。Ki67在癌组织中的表达与浸润深度、组织学类型有关(P<0.05),而与性别、年龄、淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。4 DCLK1+/Ki67细胞主要分布于肠黏膜隐窝的基底部及共壁腺管的共壁处。DCLK1+/Ki67癌细胞卵圆形,细胞核大深染且呈圆形或卵圆形,核仁明显,核分裂象少见；细胞质较少。5在结直肠癌组织中DCLK1’/Ki67细胞的表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),在对结直肠癌患者随访中发现高表达DCLK1+/Ki67细胞的患者生存率明显低于低表达者(P<0.05),而转移和复发率则高于低表达者(P<0.05),且随着表达强度的增加,死亡率和转移复发率也相应升高。6 DCLK1+/Ki67-细胞在结直肠癌组织的数量约占4.43%,而在人结肠癌细胞株LoVo约占6.59%,两者间的差异无统计学意义(P>0.05)结论：1.DCLK1可能参与了结直肠癌的发生、发展及转移过程。2.DCLK1+/Ki67-可作为结直肠癌肿瘤干细胞的标志物。3.DCLK1+/Ki67细胞的数量与结直肠癌患者的预后显著相关,可作为病理学预后评估的指标。