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实验目的:本实验以生长期大鼠为研究对象,观察两种不同运动强度对生长期大鼠骨骼肌肌球蛋白重链(myosin heavy-chain MHC)基因表达的影响。 研究方法:实验以100只四周龄雄性SD大鼠为研究对象,将其随机分为基础对照组,运动组大鼠分为低负荷运动组和高负荷运动组,在低、高运动组中又分为3周组、6周组和9周组,同时为避免正常生长发育与运动因素相互作用,特设相应的组间对照组,每组10只。将各笼大鼠分别饲养,自由饮食。整个运动期为9周,3周为一个训练阶段,分3周、6周和9周三个阶段。运动频度为每周5天,运动时间为每天60分钟。运动组大鼠在跑台上分别以12米/分、20米/分的速度进行持续上坡跑,跑台坡度为5度,基础对照组在其他各组训练前1天,运动组及相应对照组分别于运动3周、6周、9周后次日安静时断头处死,取双侧股四头深层肌,液氮冷冻并于—80℃保存待用。采用半定量反转录聚合酶链式反应测定股四头肌MHC mRNA的含量。 实验结果显示:1)正常生活状态下生长期大鼠股四头肌MHC mRNA水平没有什么变化,表现型的特征是比较稳定的。2)低负荷(12米/分,5°坡度)和高负荷(20米/分,5°坡度)的耐力运动三周、六周、九周后,生长期大鼠股四头肌MHC-Ⅰ mRNA水平的基本没有什么变化,从基因水平上说明了这两种强度的耐力运动很难引起生长期大鼠MHC-Ⅰ型股四头肌纤维的转变。3)低负荷(12米/分,5°坡度)和高负荷(20米/分,5°坡度)分别运动三周、六周和九周后,结果都显示:MHC-Ⅱb mRNA下调,相应的MHC-Ⅱa mRNA、MHC-Ⅱx mRNA水平上调。推测耐力运动可以使生长期大鼠股四头肌在基因水平上出现快MHC向慢MHC转化。从结果的变化趋势看,低负荷运动对MHC-Ⅱa mRNA水平的影响比高负荷运动对其的影响大,高负荷运动对MHC-Ⅱx mRNA水平的影响比低负荷影响大。推测在基因表达水平上,耐力运动的负荷强度在骨骼肌纤维MHC同工型的转变中起重要作用。4)对于生长期大鼠,无论是低负荷训练(12米/分,5°坡度)还是高负荷训练(20米/分,5°坡度),运动持续的周期越长,对大鼠骨骼肌MHC-Ⅱ各亚型的基因表达水平影响越显著。