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轮虫是淡水水体重要的浮游动物类群,由于其对环境变化相当敏感,因此常被用于水域生态研究的指示生物。本试验中选取了卜氏晶囊轮虫(Asplanchna brightwelli)作为试验材料,研究了温度对卜氏晶囊轮虫生长发育的影响。并进一步克隆了卜氏晶囊轮虫两种MnSOD基因的全长,利用Real time quantitative PCR检测了不同温度下线粒体MnSOD,细胞质MnSOD与hsp70 mRNA表达量之间的关系。尝试从传统生态学与分子生态学两个方面研究温度对具有捕食性的卜氏晶囊轮虫生长发育的影响,并探究这些基因的功能。本论文的研究内容有以下三个方面:1.温度对卜氏晶囊轮虫的寿命与繁殖的影响温度对卜氏晶囊轮虫的生长发育产生明显的影响。随着温度的升高,平均寿命、世代间隔、生殖前期、生殖期、生殖后期都呈缩短的趋势;平均后代只有在37℃(9.3 ±2.5)时才显著减少(P<0.05),15℃、30℃相对于对照组(25℃,13.7 ±2.7)无明显变化。2.卜氏晶囊轮虫MnSOD的克隆通过其他物种的线粒体MnSOD和细胞质MnSOD的基因序列,设计兼并引物,扩增产物经NCBI BLAST比对确认后,利用RACE技术扩增出全长,得到卜氏晶囊轮虫线粒体MnSOD和细胞质MnSOD基因的全长。线粒体MnSOD基因全长918bp,开放阅读框ORF为681bp,编码226个氨基酸,蛋白质分子量为25.2 kDa,没有信号肽,为线粒体蛋白;细胞质MnSOD基因全长941 bp,开放阅读框ORF为705 bp,编码234个氨基酸,蛋白质分子量为26.1 kDa,预测到有信号肽,是胞外蛋白。3.温度对卜氏晶囊轮虫MnSOD与hsp70基因表达的影响利用荧光定量分析结果显示:在低温(15℃)下,两种MnSOD基因都是经短暂的上调之后恢复到正常水平;30℃处理下,两种MnSOD的表达量都逐渐增加,在3h达到显著水平(P<0.05)并维持在相对较高的水平上。37℃时,线粒体MSOD变化明显,细胞质MnSOD一直维持在较高的变化水平(P<0.05)。15℃下,卜氏晶囊轮虫hsp70 mRNA的表达量逐渐增加,在暴露2h时,mRNA表达量检测值达到最大;当暴露在30℃下时,hsp70mRNA的表达量0.5 h迅速增加到2倍(P<0.05),表达量检测值达到最大;在37℃下处理时,hsp70 mRNA表达量呈逐渐增加趋势并在3 h时达到最大值。