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目的:观察金钗石斛总生物碱(DNLA)对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠和APP/PS1转基因AD模型小鼠的保护作用，并探讨其可能的作用机制。 方法:1.DNLA增加神经营养因子改善Aβ25-35诱导的AD模型小鼠神经元和突触的损伤:雄性昆明种小鼠随机分为3组(n=6)，假手术组、模型组和DNLA40 mg·kg-1组，双侧侧脑室内各注射5μg Aβ25-35造模，次日开始灌胃给药，每日1次，连续19d。水迷宫实验检测小鼠空间辨别学习记忆能力;HE染色观察其形态学改变;TUNEL染色法检测细胞凋亡情况;Nissl染色观察神经元内尼氏体的变化;电镜观察突触的结构改变;western blot检测海马和皮质内脑源性神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的蛋白表达。2.DNLA改善溶酶体蛋白水解功能促进APP/PS1转基因小鼠海马内Aβ的降解:雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为4组(n=10):APP/PS1对照组，DNLA40和80mg·kg-1组，二甲双胍(Met)80 mg·kg-1组;同性别同月龄的野生型小鼠设为空白对照组。自9月龄开始灌胃给药，每日1次，连续4月。HE染色观察海马神经元的形态学改变;电镜检测观察海马神经元内有无自噬小体及突触的改变;硫黄素S染色观察小鼠大脑内的淀粉样蛋白沉积;western blot检测小鼠海马β淀粉样蛋白1-40/42(Aβ1-40/42)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、组织蛋白酶D(CatD)、p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化p70S6激酶(pp70S6K)、Beclin1、v型ATP酶(v-ATPase)的蛋白表达;免疫荧光检测小鼠海马Aβ1-42、 LC3B、v-ATPase的表达及Cat D与甘露糖-6-磷酸受体(M6PR)共表达;mRFP-GFP-LC3_AAV9侧脑室注射观察自噬流的改变。 结果:1.DNLA可改善Aβ25-35诱导的AD小鼠学习记忆障碍，减少神经元的凋亡，减轻突触病变及丢失，增加神经元内的尼氏体，增加海马和皮质内BDNF、CNTF和GDNF的表达。2.DNLA可明显减少小鼠海马神经元内突触的丢失及神经元变性，减少海马组织中Aβ1-40和Aβ1-42的表达，对细胞外淀粉样斑块未见明显影响，主要减少细胞内的Aβ1-42。减少海马神经元内的自噬小体，尤其是自噬溶酶体，促进甘露糖-6-磷酸受体和Cat D的分离，成熟的CatD表达增加，增加海马内v-ATPase A1的表达，促进溶酶体酸化。 结论:DNLA可减轻APP/PS1转基因小鼠和Aβ25-35诱导的AD小鼠神经元和突触的病变和丢失，其机制可能与改善溶酶体的蛋白水解功能，促进Aβ的清除及增加BDNF、CNTF和GDNF的表达有关。