骨骼肌在机体运动和维持机体的正常形态方面起着很重要的作用,其生长与发展也有力的影响了生命的各种能力,肌肉的异常增生会导致多种临床疾病的发生。骨骼肌的形成需要成肌细胞融合来产生多核纤维,这是一个受多种肌源性调控因子控制的多步骤的过程。SRF（血清应答因子）是早期细胞骨架基因的主要调控因子,通过与MKLs（心肌蛋白相关转录因子）或ELKs两种转录协同蛋白结合来调控细胞的分化与繁殖,从而也对骨骼肌的形成有重要的影响,但其中具体的分子机制还不是非常的清楚。NLK（nemo-like kinase）是一种非典型的MAPK家族的激酶,它能够使底物发生磷酸化,从而发挥一系列的作用。我们发现在C57小鼠的骨骼肌中特异性敲除NLK后,会使小鼠的肌肉微管粗大,从而增加了小鼠的体重和骨骼肌例如腓肠肌的重量。由此我们猜想NLK是否对小鼠骨骼肌的发育至关重要。首先利用人胚胎肾细胞筛选发现NLK能够有效地上调SRF/ELK1信号通路,使得其下游相关基因的转录和表达水平均增强,并且能够下调SRF/MKL1信号通路,使其下游基因转录和表达减弱。接着又分别构建了NLK敲除和敲低的人结直肠癌细胞系和老鼠成肌细胞系,通过实验进一步证明NLK无论是在人还是在老鼠细胞中,对上述两条通路都起着相同的作用,并且在NLK敲低之后,成肌细胞的分化明显加快。由此看出NLK能够抑制细胞的分化。既然NLK能有影响以上两条信号通路,我们又猜想,它是不是能够与其中一种或多种蛋白发生相互作用。于是我们设计实验验证了NLK蛋白仅仅能与SRF蛋白直接结合,与ELK1和MKL1蛋白没有直接的相互作用。并且也研究了两种蛋白的细胞定位,发现它们在细胞核中有着很好的重合。NLK是一种激酶,能够使底物蛋白发生磷酸化,于是我们制定实验证实了NLK确实能够使SRF磷酸化。由此可得出结论,NLK是通过与SRF结合后使其发生磷酸化从而进一步影响上述两种信号通路的。为了证明NLK磷酸化SRF的具体分子机制,我们将SRF基因上可能被NLK磷酸化的丝氨酸和苏氨酸全部突变成丙氨酸,再设计实验,来寻找NLK对SRF的磷酸化位点,并初步发现,此位点很有可能是S101和S103两个氨基酸,但这一部分还需要更多的实验来进一步验证。并且NLK到底是通过怎样的分子机制使小鼠体重增加的也需要进一步的探索验证。综上所述,NLK能够通过磷酸化SRF调控ELK/SRF以及MKL/SRF信号通路,从而抑制了小鼠成肌细胞的分化进程,并且骨骼肌特异性敲除NLK后,小鼠的体重以及骨骼肌的重量都有所增加。