【摘 要】
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目的:从Akt信号传导通路探讨水蛭注射液后处理联合缺血后处理对脑缺血再灌注损伤后大鼠脑保护作用的可能机制,为后处理临床应用提供实验依据。 方法:60只雄性SD大鼠,随机
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目的:从Akt信号传导通路探讨水蛭注射液后处理联合缺血后处理对脑缺血再灌注损伤后大鼠脑保护作用的可能机制,为后处理临床应用提供实验依据。 方法:60只雄性SD大鼠,随机分为5组,即:假手术组(SO组)、缺血-再灌注对照组(C组)、缺血后处理组(P组)、水蛭后处理组(L-H组)、水蛭后处理+缺血后处理组(P-H组)。SO组:仅实施手术但不进行脑缺血操作,同时腹腔注射生理盐水4ml;C组:实施90min的脑缺血和24h的再灌注,在再灌注即刻腹腔注射生理盐水4ml;P组:在再灌注即刻自CCA内抽出线栓30s,然后将线栓重新置入30s,反复进行此操作3次后进行再灌注24h,并在再灌注即刻腹腔注射生理盐水4ml;L-H组:在再灌注即刻,腹腔注射水蛭注射液4mg/kg(用生理盐水稀释至4ml),并自CCA内抽出线栓持续再灌注24h;P-H组:在C组操作的基础上,在再灌注即刻,腹腔注射水蛭注射液4mg/kg。再灌注24小时后,参考Longa的5分制法对老鼠进行神经功能缺失体征评分。取大鼠缺血侧顶叶脑皮质为检测对象,采用逆转录聚合酶链反应检测脑组织AktmRNA转录水平,用免疫印迹法检测Akt蛋白磷酸化水平的改变。 结果:(1)各组神经功能评分的比较:假手术组大鼠未见神经功能缺损;除假手术组外,其余各组与对照组比较均有不同程度下降,其中:后处理组与对照组比较神经功能缺损评分稍有降低(P<0.05),水蛭后处理组与对照组比较评分较低(P<0.05);联合后处理组与对照组比较评分明显下降(P<0.01);联合后处理组神经功能既低于后处理组(P<0.05),也低于水蛭后处理组(P<0.05)。(2)各组 Akt蛋白磷酸化水平的比较:假手术组有少量蛋白表达;与假手术组比较,对照组蛋白表达明显升高(P<0.05);与对照组比较,缺血后处理组、水蛭后处理组、联合后处理组Akt蛋白磷酸化水平均升高(P<0.01),其中联合后处理组蛋白磷酸化水平更为显著(P<0.01)。(3)Akt mRNA表达的比较:假手术组有少量Akt mRNA转录;与假手术组比较,对照组Akt mRNA转录水平有所升高(P<0.05);与对照组比较,缺血后处理组、水蛭后处理组、联合后处理组Akt mRNA转录水平均升高(P<0.01),联合后处理组 Akt mRNA转录水平既显著高于缺血后处理组(P<0.01),也高于水蛭后处理组(P<0.01)。 结论:脑缺血后处理可能以促进大鼠信号通路中关键信使 Akt转录及其蛋白表达,发挥神经保护作用,水蛭注射液可增强该效应。
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