【摘 要】
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目的:研究卵巢癌细胞系和组织中HSP27的表达与顺铂耐药和患者预后的关系,以及HSP27的作用机制。方法: western-blot和Real-time RT-PCR检测卵巢癌细胞株OV2008、C13k、A2780、SK
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目的:研究卵巢癌细胞系和组织中HSP27的表达与顺铂耐药和患者预后的关系,以及HSP27的作用机制。方法: western-blot和Real-time RT-PCR检测卵巢癌细胞株OV2008、C13k、A2780、SKOV3、HO8910、CAOV3及si-C13K、NC组中HSP27mRNA和蛋白的表达水平;免疫组化方法检测101例上皮性浆液性卵巢癌病人的癌组织及10例正常卵巢组织中,HSP27的表达情况,并结合临床资料分析HSP27的表达和卵巢癌病人一线化疗耐药及无瘤生存时间的关系。在卵巢癌细胞系C13K细胞中采用RNA干扰技术,转染siRNA下调HSP27的表达,CCK-8法及流式细胞术检测并比较si组和NC组细胞对顺铂药物敏感性;细胞免疫组化检测si组和NC组细胞中caspase-3的表达。细胞免疫荧光检测P21的细胞定位和表达。结果: HSP27在C13K细胞中的表达水平显著高于其他5株细胞,差异有统计学意义(p<0.05);C13K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)明显高于其他5株细胞系;HSP27在卵巢癌中表达较正常卵巢和良性肿瘤中明显增高;生存分析发现HSP27高表达组的中位PFS显著低于低表达组;下调HSP27的si-HSP27C13K细胞与对照组比较,HSP27蛋白水平明显受抑,顺铂处理后的凋亡率明显升高,P-Akt的含量也明显下降;免疫荧光结果显示si-HSP27组和应用PI3K抑制剂LY294002的细胞组中P21从细胞浆中转移至细胞核中。结论:HSP27在卵巢癌耐药细胞系中存在高表达现象。下调HSP27表达后,增加卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。HSP27促进AKT的磷酸化,抑制P21向细胞核内转移。
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