利用分子梳技术研究DNA与蛋白质的相互作用

来源 :中国科学院物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bchen2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来由于荧光显微技术的发展,极大地推进了DNA单分子水平的研究。为了在单分子水平上探索DNA与蛋白质的相互作用,本课题主要通过分子梳技术对DNA分子及其DNA-蛋白质复合体进行拉伸,同时用荧光显微技术进行观察。 首先建立起了分子梳技术,实现了在不同的疏水薄膜上(PS、PMMA)用不同的方法(液滴蒸发法、旋涂法等)拉伸DNA分子,摸索出形成较好的DNA单分子梳的条件。 分子梳技术是一种强有力的、操作简便的在表面上拉伸DNA的方法。本文研究了Na+、Mg2+、溶液pH值对DNA分子拉伸的影响,首次观察到了DNA单分子由拉伸力导致的熔化现象。 不仅对DNA单分子进行了拉伸,本文在疏水薄膜上对DNA-组蛋白复合体进行了拉伸,也形成了好的单分子梳,研究了DNA与组蛋白间的相互作用。组蛋白使DNA发生明显的凝聚现象,DNA-组蛋白复合体的拉伸长度与组蛋白的浓度、碱基对和荧光染料的比例有着显著的关系。 应用分子梳技术研究了DNA与RecQ解旋酶间的相互作用,得到了DNA-RecQ复合体的单分子梳分布,以及解旋后复合体分子梳分布;荧光显微观察表明DNA与RecQ较易结合,RecQ使λ-DNA发生明显的解旋。原子力显微观察表明RecQ在溶液中单独存在时,以单体形式存在;能以单体形式与DNA结合,RecQ使λ-DNA发生解旋。 用分子梳技术研究了一价(Na+、K+)金属离子,二价金属离子(Mg2+、Ca2+、Mn2+)对DNA与组蛋白结合的影响;同时还进行了反应液荧光强度、荧光偏振度的检测。结果表明:一价离子、二价离子与DNA结合方式可能不同。二价离子与DNA结合过程中,使DNA的构型发生了一些变化。二价离子与组蛋白共同存在时,它们与DNA的结合起着相互促进的作用。
其他文献
陕北民歌是陕北人民群众在长期的生活劳动和斗争中口耳相传,不断加工形成的,凝结着陕北人民群众的智慧和情致,具有很高的文学性、思想性和艺术性,是地方文化造就的通俗艺术。  安塞县教育局、教研室在2010年组织了“陕北民歌新唱”地方教材研发活动,旨在加强学生的思想教育工作,充分挖掘民间艺术对未成年人思想道德建设的重要作用,全面推进素质教育的活动。对我们每一个参加的单位和参与的人员来说,这次活动最起码达到
本论文主要进行了核孔膜的蚀刻和紫外光辐照效应研究,以及在核孔膜模板内进行Cu、Co金属纳米线阵列的制备研究.在UNILAC(GSI,Darmstadt)加速器上真空和室温条件下对30 μm厚
现代科技对信息的传输速度要求越来越高,而信息的传输过程受到半导体器件的限制。在过去的二十多年里,半导体中载流子的超快动力学过程的研究有了很大的进展,其后的动力就是对半
近年来,负折射的研究成为科学界关注的热点问题。主要有两种负折射,一种是在左手材料中由负折射率导致的负折射,另一种则是在人工带隙材料中由于强烈的Bragg散射产生的负折射。
纳米医学是纳米科学技术一个重要领域.硒是人体必需的微量元素,有防治癌症作用.硒的特点是生物活性和毒性之间范围窄,高活性低毒性硒的防治癌症潜力更大.零价态元素硒被公认
扬声器阵列是将多个扬声器以某些方式相组合而进行声辐射的一类扩声设备。和单个扬声器相比,扬声器阵列可以提升声功率,增加低频时声辐射效率,提高指向性以改善声场不均匀度并且
固态电子器件小型化的趋势要求我们能够制备出纳米尺寸的有序半导体结构。因此发展有效的方法来制备大面积、高密度、尺寸可控的纳米阵列,并按照设计的意图排列成有序的结构,不
在单个分子水平上对生物大分子进行探测和操纵是目前生命领域研究的热点之一.本文提出一种基于原子力显微术的纳米操纵技术来实现生物大分子的定位单分子反应方法.本研究采用
所谓叙事性文本,就是以叙事功能为主的文学作品。这是小学阶段文体中的大门类,其包含的内容比较广泛,比如小说、故事、散文等。叙事性文本的本质是“给不具形的思想以生动的,
  本论文主要对InxGa1-xN/GaN量子阱中的三阶非线性极化率进行了研究,并探讨了由于晶格失配造成的内建压变电场对量子阱中光学非线性极化率的影响。首先,在第一章中介绍了量