论文部分内容阅读
目的：通过建立糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型,观察大鼠阴茎海绵体组织氧化应激及血管内皮细胞eNOS的表达水平,初步探讨糖尿病对大鼠阴茎海绵体组织的氧化应激损伤及其与勃起功能障碍的关系和分子机制。方法：10周龄SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为：正常对照组(A组)、柠檬酸-柠檬酸纳缓冲液对照组(B组)、糖尿病组(C组),每组20只。C组大鼠采用尾静脉注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型。所有大鼠正常饲养8周后,颈部皮下注射阿朴吗啡(apomorphine,APO),观察30min内阴茎是否勃起、并记录勃起次数。将所有大鼠称重麻醉后,取阴茎海绵体,并将阴茎海绵体分为三份：一份制备成组织匀浆,通过分光光度计检测抗氧化指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和氧化指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平的变化及NO含量；一份在透射电镜下观察阴茎海绵体超微结构变化；一份常规切片,HE染色观察大体结构,免疫组化(S-P法)检测eNOS在内皮细胞中的表达情况。各组间的数据利用SPSS17.0软件进行统计分析,以P<0.05为有统计学意义。结果：(1)糖尿病大鼠模型建立及APO试验结果：C组20只大鼠中19只糖尿病造模成功,并出现多饮、多食、多尿,体重减轻形体消瘦等症状。8周后,有4只糖尿病大鼠死于感染等各种糖尿病并发症。A、B两组大鼠阴茎都能勃起；剩下的15只C组大鼠中,只有1只出现勃起。与A、B两组大鼠相比,C组的阴茎勃起阳性率具有明显差异(P<0.05)。(2)氧化应激的变化：与A、B两对照组相比,C组大鼠阴茎组织中MDA含量增多(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。(3)组织学及超微结构的变化：A、B组可见阴茎海绵体内含有大量血窦,血窦小梁含有大量的平滑肌及胶原纤维；C组大鼠阴茎海绵体内平滑肌数量减少,胶原纤维密度增加,阴茎血管管壁增厚,管腔不规则。电镜下观察到A、B组血管内皮细胞发育良好,血窦管腔通畅,内皮细胞分布均匀,血管壁连续完整；C组血窦内皮粗糙多处断裂,小血管内皮细胞增生,管腔狭窄,血栓形成,线粒体肿胀、扩张等。(4) eNOS的表达及NO含量结果：C组大鼠阴茎海绵体组织内NO含量与其他两组相比明显的减少(P<0.05)。免疫组化结果显示eNOS在三组阴茎海绵体组织内皮细胞中均有表达。与A、B两组相比,eNOS在C组的表达明显的降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：(1)糖尿病可致成年雄性大鼠阴茎海绵体组织中MDA含量升高,SOD活性降低,发生氧化应激反应；同时糖尿病使阴茎海绵体中NO含量降低、eNOS的表达降低。(2)糖尿病导致的阴茎海绵体组织发生氧化应激,可能是阴茎海绵体组织中血管内皮细胞结构和/或功能受损的重要原因之一(3)糖尿病引起阴茎海绵体组织内皮细胞发生氧化应激,ROS生成量增多,导致内皮细胞eNOS的表达降低,内皮源性NO含量的减少,可能是引起糖尿病性ED发病的重要病因之一。